宫颈癌筛查难点与对策演示文稿.pptVIP

感染HPV病毒不代表患宫颈癌—-设定检测阈值非常重要 还没有发生细胞学改变的患者，病毒感染量较低就不会进展为CIN病变，病毒感染量较高则有发生CIN病变的风险； 已经发生细胞学改变的患者，病毒感染量较低则转归的几率较高，病毒感染量较高则进展的几率较高； * CIN病变 进展为高级病变 无CIN病变 CIN转归 风险人群 一过性感染 现在是26页\一共有36页\编辑于星期三 当Cutoff值在1.0pg/ml时，无论是自体采样还是医生采样，临床性能都是最优的 HC2设定临床阳性判断值即：cut off≥1.0pg/ml，相当于病毒载量为5000拷贝/检测，也相当于104拷贝/S J. L. BELINSON*, Y. L. QIAO et al Shanxi Province cervical cancer screening study II: Self-sampling for high-risk human papillomavirus compared to direct sampling for human papillomavirus and liquid based cervical cytology. Int J Gynecol Cancer 2003, 13, 819—826 为何WHO宫颈癌筛查指南推荐此阳性判断标准-----准确性好 现在是27页\一共有36页\编辑于星期三 为何WHO宫颈癌筛查指南推荐此阳性判断标准-----重复性好 10000 0.1 1 10 100 1000 0.1 1 10 100 1000 RLU/PC (Observed) Panel A Panel B RLU/PC (Expected) 现在是28页\一共有36页\编辑于星期三 不同方法学的探针设计 HC2 HPV检测 “全长鸡尾酒”探针技术 国外基于PCR方法的HPV检测 “寡核苷酸探针”技术 8000bp，基于全长，涵盖HPV DNA所有区域 14种不同型别探针混合 准确，不漏诊 约200bp，仅基于L1片断， 非全长 仅3种探针混合 病毒基因缺失、突变会造成漏诊 约100-150bp，仅基于L1片断， 非全长 仅1种通用探针 病毒基因缺失、突变会造成漏诊 其他国产PCR方法 “寡核苷酸探针”技术 HPV16 HPV18 HPV31 HPV33 HPV35 HPV39 HPV45 HPV51 HPV52 HPV56 HPV58 HPV59 HPV68 HPV66 HPV病毒基因组为环状双链DNA，含有~8000个碱基对。 HPV 16 HPV 18 12种HR通用探针 13种HR通用探针 现在是29页\一共有36页\编辑于星期三 HPV 病毒基因L1片段缺失导致漏诊 “由于L1开放编码框架在整合过程中发生缺失，使用L1引物会导致2–3%的假阴性结果”Capone et al, Clin Cancer Research 2000, 6:4171-4175 “使用共同的L1引物，扩增后结果显示，在56份样本中有23例的L1片段缺失” Karlsen et al, JCM 1996, 34(9): 2095-2100 (Invasive cervical carcinoma population) “在PCR检测系统中，应该使用多种共同引物和型别特异性引物” Karlsen et al, JCM 1996, 34(9): 2095-2100 (Invasive cervical carcinoma population) 恶性进展和与宿主细胞DNA整合时，可以造成病毒基因 L1片段的大量缺失 现在是30页\一共有36页\编辑于星期三 全基因组探针(HC2 HPV) L1基因段探针(PCR HPV) L1基因段缺失 检测到阳性结果 HPV DNA 检测探针 检测到阳性结果 检测到阳性结果 HC2全长基因探针 V.S PCR方法L1 寡核苷酸探针 L1片段丢失导致的假阴性 L1基因段未缺失 现在是31页\一共有36页\编辑于星期三 初筛后，对高风险人群的进一步分层管理 * 核心是采用特异度高的方法识别“病人” 技术方法的选择 对单纯HPV阳性的人群进一步风险分层管理：很多方法可以应用以进一步区分高风险人群例如：重复细胞学和HPV 检测，HPV分型检测，HPV病毒负荷/载量，,P16/Ki67, L1蛋白，宿主基因甲基化分析，mRNA检查等 初筛后，对高风险人群分流方法的选择应考虑医院现有的条件和病人随访依从性灵活选择 重复细胞学和HPV检测是最简单和方便实用的分流和随访的方法 如果有条件，可以采用以上提到的其他辅助方法进行人群的分流和管理 Binn