土壤中分解尿素的细菌的分离和计数-上课用.pptxVIP

一、课题背景;3、常见的分解尿素的微生物; 1、实例：;问：为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来？; 原因：因为热泉温度70～800C，高温淘汰了绝大多数微生物〔不耐热〕，只有Taq细菌被筛选出来。; 要别离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等；配置适宜的培养基 方法： ⑴抑制大多数微生物生长 ⑵造成有利于该菌生长的环境， 结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过稀释涂布平板法等方法对它进行纯化培养别离。;15.0g;;;;【统计菌落数目】;稀释涂布平板法。;;本卷须知 ①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。 ②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。 ③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。 ④涂布平板法所选择的稀释度很重要，一般以三个稀释度中的第二个稀释度所出现的平均菌落数在50个左右为最好。;〔三〕设置对照; 设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。;小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。;二.实验的具体操作 ㈠.土壤取样 从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。 ◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。 ㈡.制备培养基： 制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。;◆应在火焰旁称取土壤10g。 ◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行;;101;㈣.取样涂布;㈤.微生物的培养与观察;微生物的培养与观察;三.结果分析与评价 1.通过对照实验，假设培养物有杂菌污染，菌落数偏高；假设培养物混入其他氮源，那么菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出分解尿素的微生物。 2.提示：选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最适宜。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。;大小、形状〔圆形，假根状，不规那么状〕 外表特征〔光滑，皱缩，颗粒状，龟裂状，同心圆状〕 隆起形状〔扩展，??状，凹面，凸面，乳头状〕 边缘情况〔整齐，波状，裂叶状，锯齿状〕 外表光泽〔无光泽，金属光泽，闪光〕 质地〔油脂状，膜状，粘脆〕 颜色、透明度;四、操作提示 ;五.课外延伸 在以尿素为唯一氮源的培养基中参加酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。;大肠杆菌呈 黑色中心 ,有或无金属光泽;本课题知识小结:;六、例题解析 ;　　例2．在微生物群体生长规律的测定中，种内斗争最显著最剧烈的时期是 　　A．调整期 　B．对数期 　　C．稳定期 D．衰亡期;1.对细菌群体生长规律测定的正确的表述是〔 　〕 A.在液体培养基上进行 B.至少接种一种细菌 C.接种一个细菌 D.及时补充消耗的营养物质 2.使用选择培养基的目的是〔 　〕 A.培养细菌　　 B.培养真菌　　 C.使需要的微生物大量繁殖 D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别 3.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是( ) A.CO2和N2 B.葡萄糖和NH3　　 C.CO2和尿素 D.葡萄糖和尿素;4.以下说法不正确的选项是〔 　〕 A.科学家从70－80度热泉中别离到耐高温的TaqDNA聚合酶 B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值 C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度 D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。 5.为培养和别离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中参加〔　　〕 A.较多的氮源物质 B.较多的碳源物质 C.青霉素类药物 D.高浓度食盐;　　例3．〔2005年江苏〕抗生素作为治疗细菌感染的药物，其高效性和巨大的经济价值使抗生素工业经久不衰。其中青霉素的发现和应用具有划时代的意义。 ⑴青霉素发酵产生青霉素。青霉菌的新陈代谢类型是 ，青霉素是青霉菌的 代谢产物。 ⑵在生产和科研中，常选用处于 期的青霉菌作为菌种或研究材料，因为此时的青霉菌代谢旺盛， 和 比较稳定。 ⑶对青霉菌菌体生长情况的测定：取一定体积的发酵液，经离心别离、反复洗涤后，