维生素类药物的分析教案.docVIP

- PAGE 20 - 维生素类药物的分析 [教学目的] 掌握维生素A、B1、C、D、E的结构、性质和鉴别、检查、含量测定方法。 熟悉本类药物其它的含量测定方法以及杂质检查方法。 了解维生素A三点校正法的推导过程。 [本章分配学时数] 2学时 [教学环节与教学内容] [复习引入] 2分钟 在上节课，我们进行了杂环类药物的分析，要求同学们通过上一章的学习不仅要掌握吡啶类、喹啉类、托烷类、吩噻嗪类、苯并二氮杂卓类药物的鉴别和含量测定的基本原理与方法，熟悉本类药物中典型药物国外药典收载的鉴别和含量测定方法，还要了解本类药物的体内分析方法。那么，这节课我们就要对维生素类药物进行分析，经过本章的学习后，要求同学们不仅要掌握维生素A、B1、C、D、E的结构、性质和鉴别、检查、含量测定方法，熟悉本类药物其它的含量测定方法以及杂质检查方法，还要了解维生素A三点校正法的推导过程。 [教授新课] 维生素（vitamins）是维持人类机体正常代谢功能所必需的一类活性物质，主要用于机体的能量转移和代谢调节，体内不能自行合成，须从食物中摄取。 从化学结构上看，都是有机物，但并非同属一类化合物，有醇、酯、酸、胺、酚和醛。按其溶解度可分为脂溶性维生素和水溶性维生素。 　维生素A的分析 维生素A包括有维生素A1、去氢维生素A（A2）和去水维生素（A3）。其中A1活性最高，A2是A1的30％～40％，A3是A1的0.4%。通常所说的维生素A是指维生素A1。维生素A1是一种不饱和脂肪醇，在自然界中主要来自鲛类无毒海鱼肝脏中提取的脂肪油（鱼肝油），目前主要采用人工合成方法制取。在鱼肝油中维生素A1多以各种酯类混合物的形式存在，其中主要为醋酸酯和棕榈酸酯。 结构与性质 结构 维生素A的结构为具有一个共轭多烯醇侧链的环已烯，因而具有许多立体异构体，共轭多烯结构具有紫外吸收，可采用紫外吸收光谱法进行鉴别，采用紫外分光光度法进行含量测定。天然维生素A主要是全反式维生素A，尚有多种其它异构体，R不同则可以是维生素A醇或其酯，见表9-1，临床上多用其醋酸酯和棕榈酸酯。其它异构体具有相似的化学性质，但各具不同的光谱特性和生物效价，见表9-2。 性质 溶解性 与氯仿、乙醚、环已烷或石油醚能任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。 不稳定性 维生素A中有多个不饱和键，性质不稳定，易被空气中氧或氧化剂氧化，易被紫外光裂解，特别在加热和金属离子存在时，更易氧化变质，生成无生物活性的环氧化合物维生素A醛或维生素A酸。因此，维生素A及其制剂除需密封在凉暗处保存外，还需充氮或加入合适的抗氧剂。 紫外吸收特性 维生素A分子中具有共轭多烯醇的侧链结构，在325nm～328nm的范围内有最大吸收，可用于鉴别和含量测定。 与三氯化锑呈色 维生素A在氯仿中能与三氯化锑试剂作用，产生不稳定的蓝色。可以此进行鉴别或用比色法测定含量。 鉴别试验 三氯化锑反应（Carr-Price反应） 原理 维生素A在饱和无水三氯化锑的无醇氯仿溶液中即显蓝色，渐变成紫红色。其机制为维生素A和氯化锑（Ⅲ）中存在的亲电试剂氯化高锑（Ⅴ）作用形成不稳定的蓝色碳正离子。 注意事项 反应需在无水、无醇条件下进行。因为水可使三氯化锑水解成氯化氧锑，而乙醇可以和碳正离子作用使其正电荷消失。所以仪器和试剂必须干燥无水，氯仿中必须无醇。 紫外吸收光谱法 在300nm～400nm的波长范围内进行扫描，应仅在326nm的波长处有单一的吸收峰，经水浴加热30s，则应在348、367和389nm的波长处有三个尖锐的吸收峰。 薄层色谱法 比较供试品溶液和对照品溶液所显蓝色斑点位置。 含量测定 紫外分光光度法：维生素A法定的含量测定方法 三氯化锑比色法：反应专属性差、呈色极不稳定，但由于操作较为简便、快速，目前仍为食品或饲料中维生素A含量测定的常用方法。 紫外分光光度法（三点校正法） 为何要采用三点校正法？ 维生素A原料药中常混有杂质，如维生素A2、维生素A3、维生素A的氧化产物、鲸醇以及维生素A的异构体，这些杂质在维生素A的最大吸收波长附近有吸收，以致在维生素A的最大吸收波长处测定的吸收度并非是维生素A所独有的吸收，干扰维生素A的测定。采用三点校正法可以消除这些杂质的干扰。 测定原理 本法是在三个波长处测得吸收度，根据校正公式计算吸收度A校正值后，再计算含量，故本法称为“三点校正法”。 杂质的无关吸收在310nm～340nm的波长范围内几乎呈一条直线，且随波长的增大吸收度下降。 物质对光吸收呈加和性的原理。即在某一样品的吸收曲线上，各波长处的吸收度是维生素A与杂质吸收度的代数和，因而吸收曲线也是二者吸收的叠加。 波长选择 一点选在维生素A的最大吸收波长处（λ1），其它两点选在λ1的两侧各选一点（λ2和λ3） 第一法（等波长差法）：使λ3-λ1＝λ1-