基于GUS与Fluc（萤火虫荧光素酶）的原生质体双报告载体的构建.docxVIP

基于GUS与Fluc（萤火虫荧光素酶）的原生质体双报告载体的构建 摘 要：luciferase基因编码的荧光素酶，在催化荧光素氧化的过程中，会发出生物荧光。GUS基因编码的β-葡萄糖苷酸酶，以4-甲基伞形酮-D-葡萄糖醛酸苷为底物，产生具有荧光的4-甲基伞形酮。荧光素酶和荧光素生物发光体系与GUS荧光反应体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达，进而研究植物细胞基因的表达量。pGRDR载体中的CaMV 35S promoter (enhanced)是强启动子，具有持续性，不表现时空特异性。因此，以pGRDR载体为原始载体，利用PCR、琼脂糖凝胶电泳、胶回收、质粒提取等生物化学与分子生物学方