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微生物工程工艺与设备萃取分离技术及其设备双水相;双水相萃取技术;主要内容;溶剂萃取被寄予厚望,;1896年,Beijerinck发现,当明胶与琼脂(或可溶性淀粉)溶液相混时,分为两相,上相富含明胶,下相富含琼脂(或淀粉)。;;双水相萃取技术(Aqueous two-phase extraction);常用双水相系统;1)高聚物/高聚物双水相体系:由于高聚物之间的不相溶性,即高聚物分子的空间阻碍作用,相互无法渗透,不能形成均一相,从而具有分离倾向,在一定条件下即可分为二相。
2)亲水性溶剂/无机盐体系:其形成与盐的盐析作用紧密相关,即盐离子与亲水性溶剂争夺水分子形成缔合水合物,并最终和高聚物分离为两相。;(1) 大量杂质能够与所有固体物质一起去掉,可将多个分离步骤整合为一,使整个分离过程更经济。
;(2) 系统含水量高,两相界面张力极低(10 - 7~10 – 4 N·m - 1) ,有助于保持生物活性和强化相际间的质量传递;
(3) 双水相分配技术易于连续化操作,容易放大,适合工业应用;
(4) 目标产物的分配系数一般大于3 , 目标产物收率高;
(5) 设备投资费用少,操作简单,不存在有机溶剂残留问题;
(6) 影响因素复杂,可控方法较多。
;;双水相萃取影响因素;双水相萃取影响因素;1、疏水作用
i、疏水性按下列次序递增:
葡萄糖硫酸盐 甲基葡萄糖 葡萄糖 羟丙基葡聚糖 甲基纤维素 聚乙烯醇 聚乙二醇 聚丙三醇。
ii、同一聚合物的疏水性随分子量增加而增加。;i、盐的种类及浓度; ii、 pH 值的影响
; i、电中性蛋白质分子量
K随分子量增大而减小
;5、温度
温度影响小, 一般在室温下进行,不需冷却。
(1) 很多聚合物对蛋白质有稳定作用,常温下蛋白质不会发生变性;
(2) 常温下溶液粘度较低,容易相分离;
(3) 常温操作节省冷却费用。;; 目前已知的胞内酶约2500种,但投入生产的很少。;双水相提取胞内酶的具体操作:;双水相萃取的工艺流程
双水相萃取技术的工艺流程主要由三部分构成:目的产物的萃取; PEG的循环; 无机盐的循环。
;;;;谢谢观看!
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