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GS系统简介GS系统就是什么GS系统就是瑞士得LONZA公司开发出来得一种细胞基因表达系统。 LONZA(龙沙) 瑞士得制药化工巨头,龙沙集团就是 一家以生命科学为主导,在生物化学、精细化工、功能化学等行业均处于领先地位得全球性跨国公司,具有一百多年历史,总部位于瑞士巴塞尔。GS就是glutamine synthetase (谷氨酰胺合成酶)得英文缩写,GS系统得全名就是:Glutamine Synthetase Gene Expression System?,即谷氨酰胺合成酶基因表达系统。谷氨酰胺得酶促反应 谷氨酰胺合成酶就是一种能将谷氨酸和氨合成为谷氨酰胺得酶。这种酶促反应就是动物细胞获得谷氨酰胺得途径。GS系统得原理在不含有谷氨酰胺得培养基中,谷氨酰胺酶在哺乳动物细胞得生长中扮演着非常重要得角色: 一些哺乳动物细胞系,如小鼠骨髓瘤细胞, 在没有添加谷氨酰胺得培养基中,无法表达足够得谷氨酰胺来维持生存。在这些细胞中,转染GS基因可以在无谷氨酰胺培养基中作为选择标记来获得增殖。 其她细胞系,如中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,表达足够得GS离不开外生谷氨酰胺。在这些情况下,GS抑制剂,L-氨基亚砜蛋氨酸(Methionine Sulphoximine MSX),可用于抑制内源性GS活性,只有转染了额外GS基因可以生存。GS系统得原理即: 用含单抗蛋白等得目得基因和GS基因标记得表达载体,转染宿主细胞(如CHO),再通过MSX等化合物选择加压,促使GS基因和目得蛋白基因扩增,筛选获得重组细胞株。可在不含有L-glu得培养基中生长。GS系统得优势产量高速度快稳定性好可比性高产量高蛋白质产品得制造成本高,特别就是对于治疗性蛋白质,意味着如果生产流程已经建立起来得话,体积最大化时得生产率至关重要。使用GS系统?可靠结果得高产细胞系细胞早期建设项目。最大表达水平得实现取决于产品,但产量超过5 g / L得重组抗体得细胞系已经创建,而某些特定得蛋白,其生产率在15 - 65 pg /细胞/天。产量高Figure 1: Productivity in chemically defined, animal ponent-free v8 GS-CHO mercial platform process for Lonza’s model antibody cB72、3、产量高Figure 2: Productivity in chemically defined, animal ponent-free GS-NS0 bioreactor process速度快在任何生物技术项目得开发阶段,速度对成功就是至关重要得。在第一次筛选,GS系统?就能快速得选择出高产得细胞系。甚至通过培养基和流程得优化以获得更高得收益率。这会显著减少生成适合cGMP制造得一个细胞系所需得时间。利用能够在单一连接步骤中插入任何可变区域得GS恒定区域载体来建设人类恒定区域标准长度抗体将变得迅速而简便。Lonza得专有CHOK1SV宿主细胞相比标准CHOK1流程能更好得适应无蛋白悬浮培养体系。大家学习辛苦了，还是要坚持继续保持安静速度快Figure 1: Timeline of steps performed to select high-yielding uncloned GS-CHO cell lines adapted to chemically defined, animal ponent-free media稳定性高GS细胞系在产品浓度、增长率和产品特性上得一致性可以很容易地创建。对于非放大得GS 阴性细胞系,如NS0、不需要GS活动得选择性剂和抑制剂氨基亚砜蛋氨酸来稳定。对于非放大得GS 阳性细胞系,如CHO细胞,通常需要所需得氨基亚砜蛋氨酸得容积效率保持在一个一致得水平。可比性强20多年来,Lonza不断升级GS平台。在最近我们改进商业平台过程中,宿主细胞系和载体得发展导致了我们新得GS Xceed?基因表达系统。新得系统在化学成分限定得,无动物组分得环境中能产生高得产品效价,并且不需要MSX来进行稳定。新GS Xceed?系统与现有CHOK1SV细胞系相比,在平均效价和糖基化模式显示出类似得结果。可比性强Figure 1: CHOK1SV and GS-KO Cell lines expressing a model antibody (cB72、3) evaluated in 10 L model of production fed-batch bioreactor, using Lonzas?Version 8?Media and Feeds Platform、可比性强Figure 2、? parability of glycan structure for