DB22T 415-2005熟食制品中山梨酸、苯甲酸的测定.docx

DB22 吉 林 省 地 方 标 准 DB22/T 415—2005 熟食制品中山梨酸、苯甲酸的测定 Determination of sorbie acid and benzoic acid in food 2005 — 11 — 01发布 2004 — 12 — 01实施 吉 林 省 技 术 监 督 局 发布 前言 本标准由吉林省卫生厅提出。 本标准由吉林省卫生监测检验中心负责起草。 本标准主要起草人：战英、杨明远、边疆、张丽薇、崔勇。 本标准于2005年11月首次发布。 熟食制品中山梨酸，苯甲酸的测定 1. 范围 本标准规定了熟食制品中山梨酸，苯甲酸的测定的原理、试剂、仪器、分析步骤。 本标准适用于熟食制品中山梨酸，苯甲酸含量的测定。 2. 原理 样品经盐酸酸化用乙醚提取，浓缩，用乙醇定容。除去脂类，测定。 3. 试剂 本标准规定所用试剂为分析纯，优级纯，色谱纯。实验用水为去离子水。 3.1 山梨酸，苯甲酸标准溶液的配制： 准确称取山梨酸，苯甲酸各0.1000g, 用无水乙醇溶解并定容至100mL 作为储备液， 此时溶液浓度相当于1mg/mL。 分别吸取0,2.5,5.0,7.5,10.0 mL 储备液于100ml 容量瓶中，用无水乙醇定容。此时标准使用液浓度分别相当丁0,25,50,75,100ug /mL。 3.2流动相：甲醇：乙酸铵(称取1.26g 乙酸铵定容至1000mL, 过0.22um 滤膜)0.10:0.60 4. 仪器 4.1高效液相色谱仪。 4.2紫外检测器。 4.3柱温箱。 4.4r超声波发生器 5. 分析步骤 5.1色谱条件： SpherisilODS C?8柱(20mm×4.6mm, 粒径5um), 紫外检测器，波长230nm, 柱温35℃, 流速0.7mL/min 5.2样品处理。 以四分法取样。称取事先切碎混匀的样品1.0g 左右于10mL 比色管中，加0.2mL6mol/L 的盐酸酸化，准确加10mL 乙醚，充分振摇后于超声波提取10min。 吸取上层乙醚溶液 5mL 于另一 10mL 比色管中，40℃水浴挥干溶剂。加1mL 无水乙醇溶解残渣。将此比 色管置于冰水浴中2min, 使脂类凝固，取出迅速过0.22um 滤膜，备用。 5.3标准曲线的绘制 吸取10uL浓度分别为0,25,50,75,100 ug/mL 的标准溶液进高效液相色谱仪，记 录峰高或峰面积，绘制标准曲线。 5.4样品测定 吸取10uL 样品制备液进高效液相色谱仪，记录峰高或峰面积，利用标准曲线定量。其 保留时间分别为15.320 min,21.293 min, 见谱图。 5.5计算 h?×C×V×2 p= p h?×m×1000 式中 p: 山梨酸，苯甲酸含量g/kg h? 样品中山梨酸，苯甲酸的峰高或峰面积 h? 标准中山梨酸，苯甲酸的峰高或峰面积 C 标准溶液的浓度 ug /ml Voltsm 样品的质量g Volts V 样品定容后的体积mL 5.6方法最低检出浓度山梨酸和苯甲酸分别为0.25ug/mL 和0.5ug/mL。 若取样1.0g, 检 出限分别为0.0005g/kg和0.001 g/kg。 标准曲线线性范围为0～100ug/mL。 方法平均回收 率分别为88.7～103.7%和91.2～110.5%,相对标准偏差3.91%和3.76%。 图 1