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蛋白质的生课程;;第3页/共93页;一、 mRNA是翻译的模板;;4种碱基如何编码20种氨基酸?;Because poly(U) mRNA is made up of many successive UUU triplets, it should promote the synthesis of a polypeptide containing only the amino acid encodedby the triplet UUU. A radioactive polypeptide was indeed formed in only one of the 20tubes, the one containing radioactive phenylalanine. Niren-berg and Matthaei therefore concluded that the triplet codon UUU encodes phenylalanine. The same approach revealed that polycytidylate,poly(C), encodes a polypeptide containing only proline(polyproline), and polyadenylate, poly(A), encodes polylysine. Polyguanylate did not generate any polypeptide in this experiment because it spontaneously forms tetraplexes that cannot be bound by ribosomes.;;遗传密码的特点;1. 方向性(directional);2. 连续性(non-punctuated);基因损伤引起mRNA阅读框架内的碱基发生插入或缺失,可能导致框移突变(frameshift mutation)。;已发现少数例外,如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。;简并性(degeneracy);摆动配对;二、核糖体是蛋白质生物合成的场所;第17页/共93页;第18页/共93页;P-site
肽酰位
给位;肽酰转移酶
位于大亚基P位和A位的连接处,属于核酶,催化肽键形成;32种;CCA-3’ terminus :
amino acid is coupled;第23页/共93页;四、参与蛋白质合成的酶类,蛋白因子;氨基酸 +ATP-E 氨基酰-AMP-E + PPi ;第二步反应;第27页/共93页;第28页/共93页;真核生物: Met-tRNAiMet
原核生物: fMet-tRNAifMet;起始;第31页/共93页;一、翻译的起始阶段;eIF-1;第34页/共93页;原核生物翻译起始过程;;IF2(GTP);A位留空;IF-3;第40页/共93页;延长因子(原核)(elongation factor);进位(entrance)
注册(registration);Tu;成肽
(peptide boud formation);第45页/共93页;1、核糖体沿mRNA5’向3’端移动一个密码子,使二肽酰tRNA从A位移至P位
2、下一个密码子进入A位
3、原核生物tRNA从P位进入E位;真核生物tRNA直接从核糖体上脱落;;;延长总结;RF;肽链从结合在核糖体上
的肽酰tRNA上水解;第52页/共93页;真核生物(eIF);大小亚基分离;;;原核生物与真核生物肽链合成过程的主要差别;;蛋白质生物合成过程中,在一条mRNA链上结合着多个核糖体成串珠样排列,同时合成多条相同的多肽链,这种存在形式叫;第四节蛋白质翻译后修???和靶向输送;一、多肽链折叠为天然构象的蛋白质;1. 分子伴侣:;(1) 热休克蛋白(heat shock protein, HSP)
热休克蛋白包括HSP70、HSP40和GrpE三族。;大肠杆菌中的HSP70 反应循环;(2) 伴侣蛋白(chaperonin);当待折叠肽链进入Gro EL的桶状空腔后,Gro ES可作为“盖子”瞬时封闭Gro EL空腔出口。封闭后的桶状空腔提供了能完成该肽链折叠的微环境。;Gro EL-Gro ES反应循环 ;二、蛋白质一级结构修饰主要是肽键水解和化学修饰 ;糖链的添加(糖基化,glycosylation);第70页/共93页;例:鸦片促黑皮质素原(POMC)的水解修饰;三、空间结构的修饰;四、合成后蛋白质可被靶向输送至细胞特定部位;碱性氨基末端;真核细胞分泌型蛋白质的靶向输送过程为:核蛋白体上合成的肽链先由信号肽引导进入内质网腔并被折叠成为具有一定功能构象的蛋白质,在高尔基复合体中被包装
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