实验十二植物细胞骨架的光学显微镜观察.pptxVIP

实验十二植物细胞骨架的光学显微镜观察;实验12植物细胞骨架的光学显微镜观察; 实 验 目 的;实 验 原 理 ;细胞骨架在通常固定条件下不稳定，如低温、高压、锇酸处理，而且MF、MT、IF都是直径非常小的结构，只有在电镜下才能够观察到。 研究细胞骨架常规的实验方法： 电镜观察、组织化学、免疫荧光等 研究细胞骨架常规的实验方法 本实验采用的特殊方法 ;Triton X－100 Triton X－100是一种非离子型去垢剂，可以除去可溶性蛋白质和脂类，而微丝束不会被Triton 破坏而保留在细胞中。 通过Triton的处理去掉了一部分杂蛋白，使细胞骨架显现更清晰。 M－缓冲液 成分：咪唑、EDTA、EGTA、MgCL2等 咪唑是一种缓冲剂；EDTA 、EGTA螯合Ca离子，保持一种低钙条件。 使骨架纤维保持在聚合状态并且较为舒张。 考马斯亮蓝R250 是一种普通的蛋白质染料，可以使细胞内各种蛋白质染色。 本实验中，有些骨架纤维不稳定，如微管；有些纤维太细，在光学显微镜下无法分辨。 在实验中观察到的纤维主要是微丝束，由许多微丝结合在一起，直径约在40nm左右，考马斯亮蓝R250染色对微丝束的显示起了夸大的作用。;仪器、材料与试剂; 实 验 步 骤;结果观察;注意事项;感谢您的欣赏