基因工程2载体.pptxVIP

第1页/共35页基因工程2载体第2页/共35页pBR322酶切图谱F. BolivarplasmidpBR322R. L. RodriguezBacterial Resistance第3页/共35页2.pUC系统美国加利福尼亚大学的科学家J. Messing和J. Vieria于1987年首先构建来自pBR322质粒的复制起点氨苄青霉素的抗性基因大肠杆菌β-半乳糖酶基因的启动子及其编码的α-肽链基因（lacZ’）位于lacZ’基因内的一段MCS区段第4页/共35页第5页/共35页第6页/共35页2.pUC系统-----蓝白斑筛选β-半乳糖苷酶X-gal溴氯吲哚+ β-半乳糖苷插入片段 无酶活性 白斑未插入片段 有酶活性 蓝斑第7页/共35页3. TA载体经 Taq DNA 聚合酶扩增后的 PCR 产物末端都带有单个 A 第8页/共35页酵母菌质粒载体食品级微生物适合于真核基因表达基因产物外分泌第9页/共35页七、酵母菌质粒载体 多数酵母中含有一种能独立复制的环状双链DNA，称为2μ质粒，长约6.3kb，有单一的复制起始点和一个自主复制功能区域（ARS片段）。 1.酵母菌质粒载体的类型整合型、复制型、附加型和稳定型等类型。 2.酵母菌质粒载体的特点①含有E.coli质粒的复制起始序列。②含有酵母的筛选标记（如LEU2）③具有合适的供外源基因插入的