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兽医微生物学肠杆菌科第1页/共28页 课件0022 本科共同特性为：革兰氏阴性、无芽孢的兼性厌氧菌，共28属、110种。多为正常肠道菌群成员。沙门氏菌属、志贺菌属、以及埃希菌属和耶尔森菌属的部分成员对人和动物有广泛的致病性，在公共卫生和兽医临有重要意义。 第一节 埃希菌属 本属现有5个种，其中最重要的种是大肠埃希菌(E.coli)，俗称大肠杆菌，下分血清型。本菌系人和温血动物肠道内正常菌群成员之一。 大肠杆菌常被用作粪便直接或间接污染的检测指标（水、空气）； 本菌还是分子生物学和基因工程中重要的实验材料和研究对象，原核表达。第2页/共28页 课件0023一、形态染色特性 大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的杆菌，大小0.4-0.7 um×2-3um，两端钝圆、散在，周身鞭毛可运动，多有菌毛。二、培养及生化特性 本菌为兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好，在营养琼脂上，形成圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落，径约2-3mm； 本菌大多可以发酵乳糖产酸产气，麦康凯琼脂上形成红色菌落；在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属闪光的菌落；一些致病性菌株在绵羊血平板上呈β溶血。第3页/共28页 课件0024粪便中大肠杆菌的分离与鉴定10倍递增稀释鉴定、保存第4页/共28页 课件0025空气中大肠杆菌的分离与鉴定样本37℃培养24h染色镜检纯培养先进行初步生化鉴定，不确定的菌株再用API 20 E鉴定API 20E 鉴定试条第5页/共28页 课件0026三、抗原及血清型 大肠杆菌抗原主要有O、K和H三种，是本菌血清型鉴定的物质基础。已确定的大肠杆菌O抗原有173种，K抗原有80种，H抗原有56种。大肠杆菌血清型可高达数万种，但致病性大肠杆菌的血清型数量是有限的。1. O抗原 耐热，121C加热2h不破坏其抗原性。抗原性特异性决定于脂多糖-LPS的特异多糖侧链的结构。每个菌株只含有一种O抗原，用单因子抗O血清做玻板或试管凝集试验鉴定之。2. K抗原 热不稳定抗原，为被膜或荚膜、菌毛抗原。具有K抗原菌株不被抗O血清凝集，称为O不凝集性。一个菌落可含1-2种不同K抗原，也有无K抗原的菌株。第6页/共28页 课件0027第7页/共28页 课件0028产肠毒素大肠杆菌(ETEC) ETEC系一类致人和幼畜(初生仔猪黄痢、犊牛、羔羊及断奶仔猪腹泻)腹泻的最常见的病原性大肠杆菌。 其毒力因子 主要由黏附素性菌毛和肠毒素两类构成。 初生幼畜被ETEC感染后常因剧烈水样腹泻和迅速脱水死亡，发病率和死亡率均很高。 (1) 黏附性菌毛，能黏附于宿主的小肠上皮细胞，故又称其为黏附素或定居因子，对其抗原称作黏附素抗原或定居因子抗原。第8页/共28页 课件0029(2) 肠毒素是ETEC在体内或体外生长时产生并分泌到胞外的一种蛋白质性毒素。分为: 不耐热肠毒素(LT：heat-labile enterotoxin)和 耐热肠毒素(ST: heat stabile enterotoxin)二种。可使肠细胞分泌机能亢进，引起水样腹泻和迅速脱水。 LT对热敏感，有抗原性，65℃ 30min即被灭活。 ST耐热，无抗原性，它耐100℃加热30min而不失活，能抵抗多种蛋白酶作用。2. 产类志贺毒素大肠杆菌(SLTEC) 系一飞在体内或体外生长时可产生类志贺毒素(SLT)的病原性大肠杆菌。第16章第9页/共28页 课件00210 在动物SLTEC可致猪的水肿病，以头部、肠系膜和胃壁浆液性水肿为特征，常伴有共济失调、麻痹或惊厥等神经症状，发病率较低但致死率很高。 发现SLTEC与犊牛出血性结肠炎有关， 在致幼兔腹泻的大肠杆菌菌株中也查到SLT。 其毒力因子 包括粘附性菌毛和致水肿病2型类志贺毒素。 (1) 粘附性菌毛 ，F18菌毛是猪水肿病的SLTEC菌株的一个重要的毒力因子，它有助于细菌在猪肠黏膜上皮细胞定居和繁殖。 (2) 致水肿病2型类志贺毒素。第10页/共28页 课件00211毒力岛EHEC具有35kb LEE毒力岛p105禽致病性大肠杆菌（APEC）: 引起禽类急性的、系统性疾病的病原性大肠杆杆菌。表现为：气囊炎、肺炎、心包炎、肝周炎等第11页/共28页 课件00212（四）大肠杆菌主要毒素基因的检测5重PCR方法检测5种主要毒素基因—STa、STb、LTa、Stx1和Stx2/Stx2e；对动物舍环境中分离到的380株大肠杆菌进行了检测： 5个鸡舍—117株 5个猪舍—120株 6个牛舍—143株380株第12页/共28页 课