四环素类抗生素氨基糖苷类抗生素的生产.pptxVIP

四环素类抗生素氨基糖苷类抗生素的生产第1页/共34页 四环素类抗生素的生产四环素类抗生素的结构及特性四环素类抗生素的理化特性四环素的发酵生产四环素的提取和精制第2页/共34页 四环素类抗生素的结构及特性1、结构四环素类抗生素是放线菌产生的一类广谱抗生素，包括金霉素（Chlortetracycline）、土霉素（Oxytetracycline）、四环素（Tetracycline）及半合成四环素类抗生素。具有十二氢化并四苯基本结构。该类药物有共同的A、B、C、D四个环的母核，仅在5、6、7位上有不同的取代基。第3页/共34页 四环素类抗生素的结构及特性2、分类天然类金霉素、土霉素、四环素、地美环素（去甲金霉素） 半合成类多西环素、美他环素、米诺环素等第4页/共34页 四环素类抗生素的结构及特性3、抗菌谱及药理特点广谱，细菌（除铜绿假单胞菌），螺旋体、支原体、立克次体、衣原体。抑制细菌生长、作用较弱（不及青霉素类或链霉素类）。耐药较严重急性毒性很低副作用多第5页/共34页 四环素类抗生素的结构及特性4、作用机制四环素能够与原核细胞中的16S rRNA （30S 核糖体的组成部分）结合，从而阻碍了氨酰tRNA与16S rRNA的结合，使得由mRNA到蛋白质的翻译过程无法进行。四环素对真核细胞有一定毒性，一般认为是四环素干扰了真核细胞中线粒体30S 核糖体的功能。第6页/共34页 四环素类抗生素的理化特性1、黄色结晶粉末、味苦。2、两性化合物3、溶解性等电点pH=5.4（在等电点时，四环素呈游离碱的形式，溶解度最小）。在pH=4.5～7.2，四环类抗生素难溶于水。不易溶于水，其盐水溶性也差，故不易配制成注射液。能与各种酸、碱形成盐，盐酸盐最重要。（四环素、金霉素的理论效价以盐酸盐为标准，土霉素以游离碱为标准，1 mg = 1000 U）第7页/共34页 四环素类抗生素的理化特性4、能形成螯合物与复合物（1）在碱性的溶液中，与金属离子形成螯合物沉淀，如：钙、镁、钡离子（吸收受乳制品及二、三价阳离子影响——配伍禁忌）。（2）与其他物质形成复合物沉淀，如：长烃链的季铵碱、尿素、氯化钙等　复合物不溶于水；溶于有机溶剂，分离成四环素和尿素。四环素尿　素四环素—尿素复合物四环素尿　素第8页/共34页 四环素类抗生素的理化特性5、稳定性四环素类药物在干燥条件下稳定。但遇光色加深。在酸性或碱性溶液中不够稳定，或药效显著降低、或产生毒性（密闭、防潮、避光保存）。★第9页/共34页 四环素的发酵生产（一）孢子制备1、生产菌种金色链霉菌（Streptomyces aureofaciens）生绿链霉菌（S．viridifaciens）、佐山链霉菌（S．sayamaensis）等也能产生四环素。金色链霉菌抑氯剂四环素NaCl金霉素第10页/共34页 四环素的发酵生产2、控制要点　（1）进行简单的自然分离，　（2）节约砂土管的用量。　　麸皮琼脂斜面，36℃，4～5d（二）种子制备　　　30～32℃，24～27h第11页/共34页 四环素的发酵生产（三）发酵生产　1、培养基　　（1）碳源　　　常用：淀粉（玉米淀粉、燕麦粉、土豆粉）、可溶性淀粉、葡萄糖、糖蜜、油脂。　　　控制：玉米淀粉酶解液。　　（2）氮源　　　常用：花生饼粉、黄豆饼粉、棉籽饼粉、(NH4)2SO4、氨水、尿素等，很少用价格昂贵的蛋白胨。　影响因素：氨基酸能刺激金色链霉菌生产四环素或金霉素；过量的氮源抑制四环素的合成。控制：氨基酸浓度100～200mg/L。第12页/共34页 四环素的发酵生产（3）抑氯剂　　　影响因素：阻止金霉素的合成，促进四环素的合成，但浓度较大时对产生菌有毒性。　　　控制：抑氯剂与NaBr并用；抑氯剂加到种子罐。（4）无机盐　　影响因素：磷酸盐对菌体生长和抗生素的合成有很大影响；镁盐、钙盐促进四环素生物合成；铁离子及其他无机离子，抑制四环素的生物合成。　　控制：无机磷含量110～120mg/ml；控制铁离子及其他无机离子浓度，加CaCO3。第13页/共34页 四环素的发酵生产2、发酵条件　（1）培养温度前期温度高有利于菌丝繁殖，中后期降温是为了减缓产生菌的代谢速度，使菌丝自溶期延迟。控制：变温控制31℃-30℃-29℃　（2）溶氧菌种对溶氧极为敏感。第14页/共34页 四环素的发酵生产（3）补料　①C、N源　②pH值金色链霉菌生长，最适pH值6.0～6.8合成四环素，最适pH值5.8～6.0控制：发酵不同阶段，加入葡萄糖或淀粉和氨水控制所需pH值。　③消泡剂影响因素：油中酸价和过氧化物过多，影响四环素生物合成。控制：油的质量（4）发酵时间：通常为8d。★第15页/共34页 四环素的提取和精制发酵液滤液加草酸及黄血酸盐、硼砂等，调节pH到1.6~1.9；过滤酸化沉淀加氨水和氯化钙，