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基因工程受体第1页/共15页 一、E.coli受体系统大肠埃希氏菌(E. coli)通常称为大肠杆菌，是Escherich在1885年发现的第2页/共15页 1、E.coli受体系统的特点  ①?? 遗传背景清楚 ②???繁殖快 ③???含有质粒第3页/共15页 第4页/共15页 3、E.coli受体系统的缺点?表达产物存在于细胞内安全性欠佳缺乏基因产物表达后加工机制第5页/共15页 基因型：F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169, hsdR17(rK-, λ–特点：一种常用于质粒克隆的菌株。 其Φ80dlacZΔM15基因的表达产物与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补，可用于蓝白斑筛选。用途：分子克隆、质粒提取。DH5α菌株第6页/共15页 基因型：endA1 glnV44 thi-1 relA1 gyrA96 recA1 mcrB+ Δ(lac-proAB) e14- [F‘ traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15]hsdR17(rK-mK+)。特点：部分抗性缺陷，适合重复基因表达, 可用于M13克隆序列测定和蓝白斑筛选。用途：分子克隆、质粒提取。JM109菌株第7页/共15页 基因型：F– ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3 [lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5])。特点：该菌株用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子，该区整合于BL21的染色体上。该菌适合于非毒性蛋白的表达。用途：蛋白质表达。BL21(DE3)菌株ompT = mutation in outer membrane protein protease VII, reducing proteolysis of expressed proteins 第8页/共15页 基因型：F- ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3) pLysS(cmR)。特点：该菌株带有pLysS，具有氯霉素抗性。此质粒还有表达T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG诱导的表达。 适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。用途：蛋白质表达BL21(DE3)ply菌株第9页/共15页 四、酵母菌受体系统第10页/共15页 食品级真核单细胞微生物适合于真核基因表达基因产物外分泌遗传背景较清楚具基因表达后加工机制1. 酵母菌受体系统的特点第11页/共15页 2.常用酵母菌受体系统酿酒酵母甲醇酵母第12页/共15页 酿酒酵母酿酒酵母（Saccharomyces serevisiae）又名面包酵母，它是单细胞真核微生物，一直以来酿酒酵母被称为真核生物中的“大肠杆菌”。1.酿酒酵母表达系统表达外源基因的优点：工艺简单，可快速大规模生产；它不会产生毒素，安全可靠。适合于表达真核生物基因；外源基因可在酿酒酵母中分泌表达酿酒酵母的遗传背景清楚，容易进行遗传操作。第13页/共15页 2.毕氏酵母受体系统的优点：含特有的AOX（醇氧化酶基因）启动子，用甲醇可以严格地调控表达。毕氏酵母（甲醇酵母）第14页/共15页 感谢观看！第15页/共15页