酶工程第15章兰州大学酶工程酶在轻化工业上的应用.pptVIP

* 第十五章 酶在轻化工业上的应用 一、氨基酸生产 二、有机酸生产 三、合成甜味剂生产 四、洗涤剂制造 五、皮革加工 六、明胶、胶原纤维生产 七、废物处理和饲料加工 八、纺织工业 九、造纸工业 十、其它方面 第一页，共三十七页。 一、氨基酸生产 酶在氨基酸生产上的用途有二种： ① 用于DL-氨基酸的拆分，得到L-氨基酸。 ② 直接合成L-氨基酸。 第二页，共三十七页。 1．DL-氨基酸的拆分 化学合成的氨基酸都是外消旋体，其中只有L-型具有生理活性。先将DL-氨基酸进行酰化（在氨基上加一个乙酰基），再用酰化酶水解L-型氨基酸上的乙酰基，得到L-氨基酸；体系中剩下的酰化D-氨基酸可用消旋酶消旋，重新转变成酰化DL-氨基酸的外消旋体，由酰化酶继续拆分，直至几乎全部转变成 L-氨基酸。这种方法已在丙氨酸、蛋氨酸、色氨酸、缬氨酸的生产上应用。 第三页，共三十七页。 DL-色氨酸的酶法拆分 酰化酶来自曲霉、青霉、假单胞杆菌、酵母以及动物肾脏等。 第四页，共三十七页。 固定化酶用于氨基酸拆分 工业上是用固定化酰化酶进行连续拆分的。将酰化酶固定在DEAE-Sephadex G-25上，可用于五种氨基酸的拆分，一个1000升的酶柱月产量为10～32吨。 将酰化酶用三醋酸纤维包埋后装柱，用于酰化DL-色氨酸的拆分，在45℃连续工作50天，酶活力只损失25~30％，用4kg酶柱进行试验，每千克固定化酶可生产400kg L-色氨酸。 第五页，共三十七页。 2．L-氨基酸合成 赖氨酸是必需氨基酸之一，大量用于强化食品、饲料和作为输液成分。赖氨酸主要以发酵法生产。1982年日本采用福林的发明，以环己烷为原料，经加成反应、氨化及重排反应，生成DL-α-氨基己内酰胺，利用一种卢氏隐球酵母菌产生的L-氨基己内酰胺酶将其水解使L-体开环而成L-赖氨酸，剩下的D型体经无色杆菌的消旋酶作用而重新成为DL体。在最适反应条件下（pH8.0，40℃），使用10％的底物，可定量地转变成L-赖氨酸。 第六页，共三十七页。 赖氨酸的酶法拆分 + L-赖氨酸 第七页，共三十七页。 天冬氨酸的酶法直接合成 天冬氨酸是一种保健药，具有增强机体抵抗力，消除疲劳，促进肝功能，解除氨毒等作用。它是唯一只用酶法生产的一种氨基酸。以化学法容易合成的氨和富马酸（fumaric acid，延胡索酸）为原料，用大肠杆菌天冬氨酸酶进行反应，可以定量地合成天冬氨酸。 第八页，共三十七页。 固定化细胞生产L-天冬氨酸 将大肠杆菌细胞包埋在聚丙烯酰胺凝胶里，在含有Mg2＋的富马酸溶液中浸渍1～2天后装柱，在37℃下通入底物溶液，将流出液调节到pH2.8，冷却后天冬氨酸即结晶析出，收率可达100％。这种固定化酶很稳定，37℃下的半衰期为120天，一个1000L的酶柱一天可生产2吨L-天冬氨酸。若改用κ-角叉菜胶包埋，再用己二胺处理，可进一步提高酶的稳定性，半衰期可达680天，生产能力提高15倍。 第九页，共三十七页。 二、有机酸生产 L-苹果酸是食品工业上的酸味剂，在化工、印染、医药品生产上也有不少用途，可用发酵法和酶法生产。酶法是以富马酸为原料，以富马酸酶催化加水合成的。生产实践上是以固定化的产氨短杆菌或黄色短杆菌作为催化剂来催化的。 第十页，共三十七页。 有机酸生产 L（+）酒石酸也是一种食用酸，可以从葡萄酒副产物酒石中提取，但产量有限。用化学合成法也能制造酒石酸，但产物是DL型，水溶性较L(+)酒石酸差，不利于应用。酶法合成酒石酸是首先在钨酸钠催化下，使马来酸（maleic acid，顺丁烯二酸）与过氧化氢反应，生成环氧琥珀酸，再用微生物的环氧琥珀酸水解酶催化开环而成为L（+）酒石酸。产生环氧琥珀酸水解酶的微生物有假单胞杆菌、产碱杆菌、无色杆菌、根瘤菌、土壤杆菌、诺卡氏菌等。 第十一页，共三十七页。 L(+)酒石酸的酶法合成 第十二页，共三十七页。 三、合成甜味剂生产 天苯肽（L－天冬酰－L－苯丙氨酸甲酯）、糖精（邻苯甲酰磺酰亚胺钠）、甜蜜素（环己基氨基磺酸钠）等属于合成甜味剂。 天苯肽是一种低热甜味剂，其甜度为蔗糖的200倍。 第十三页，共三十七页。 嗜热菌蛋白酶催化天冬氨酸和苯丙氨酸反应生成天苯肽，其中天冬氨酸的氨基必须保护（苄氧甲酰化），苯丙氨酸的羧基必须甲酯化，以避免形成Asp－Asp、Phe－Phe、Phe－Asp等副产物。 天苯肽的酶法合成 CbzAsp＋PheOme CbzAsp－PheOme 嗜热菌蛋白酶 酶反应产物用钯碳催化进行氢解，脱去苄氧羰基，得到最终产物。 在生产中通常使用化