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实验六次溴酸钠法测定海水中的氨氮第1页/共22页第2页/共22页实验六 次溴酸钠法测定海水中的氨-氮第3页/共22页海水中的营养元素:氧、碳、氮、磷、硅等主要元素,还有铁、锰、铜、钼等微量元素第4页/共22页第5页/共22页第6页/共22页第7页/共22页第8页/共22页第9页/共22页第10页/共22页氮化合物在海洋中的存在形态:NH4+(NH3)、NO2-、NO3-三种无机化合氮溶解有机氮化合物不溶于海水的颗粒氮其中无机氮化合物是海洋植物最重要的营养物质第11页/共22页3. 吸光光度法原理:在一定的实验条件下,物质对光的吸收与物质的浓度成正比。显色剂:波长的选择:第12页/共22页孔雀绿的吸收光谱第13页/共22页标准系列未知样品7.2.1 吸光分析的几种方法目视比色法特点利用自然光比较吸收光的互补色光准确度低(半定量)不可分辨多组分方法简便,灵敏度低第14页/共22页0.575光电比色法分光光度法(紫外-可见分光光度法)UV-VISUltraviolet Visual Spectroscopy光源单色器吸收池检测器显示第15页/共22页实验原理:在碱性条件下,以次溴酸钠为氧化剂,将海水中的氨氧化为亚硝酸盐,亚硝酸盐在一定的pH值下与磺胺及盐酸萘乙二胺作用形成深红色偶氮染料,于543毫微米波长处进行光度测定。注意:氧化剂储备液使用液第16页/共22页实验步骤:工作曲线的制作1 分别移取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0毫升NH4Cl标准使用液于6个比色管,用人工海水稀释至刻度线(溶液浓度分别为0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00微克氨/升)2 量取2份水样于50毫升比色管中,管上做标签,与1一起做下面步骤3 用移液管依次加入5毫升氧化剂(以次溴酸钠)使用液,混匀放置30分钟第17页/共22页4 量取2份水样于50毫升比色管中,管上做标签,与前面的一起做下面步骤,来测定海水中的NO2--N 5 用移液管依次加入5毫升磺胺溶液,混匀放置5分钟6 用移液管依次加入1毫升盐酸萘乙二胺液,混匀放置10分钟7 在分光光度计上543毫微米波长处测量1的吸光值A,未加NH4Cl溶液的吸光值为空白吸光值Ab, 样品的吸光值AW, NO2--N 的吸光值A NO2-N 第18页/共22页A-AbNH4+ 浓度第19页/共22页7 以1的NH4-N浓度和A-Ab为横纵坐标作图,得到工作曲线8 水样的NH4-N吸光值为:A(NH4-N ) =AW-Ab- A NO2-N 9 根据A(NH4-N ) 在工作曲线上查出水样氨-氮的浓度第20页/共22页721型分光光度计的使用方法1 用调波长的旋钮调波长至543毫微米2 将上面的盖子打开,用中间的调零旋钮调透光值至零3 将里面盛比色皿的盒子拿出来4 用手拿比色皿的侧面(避免用手接触光面),用蒸馏水里外冲洗两次第21页/共22页5 最里面的比色皿盛蒸馏水(80%满),剩下的三个由颜色浅到深的顺序盛样品,在盛之前要用样品润洗相对应的比色皿2次,然后盛入对应的样品(80%满)。6 先用滤纸擦比色皿外面一遍,然后用擦镜纸擦干净(特别是光面),按顺序放入盛比色皿的盒子中(放正),用盒子上的铁皮固定好第22页/共22页感谢您的欣赏Sheet3
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