农业农村部公告第323号-28-2020CN.docx

ICS 65.020.01 B 04 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 农业农村部公告第323号一28-2020 转基因生物及其产品食用安全检测 抗营养因子 马铃薯中龙葵碱检测方法 液相色谱质谱法 Food safety detection of genetically modified organisms and derived products— Determination of anti-nutrient solanine in potato Liquid chromatography-mass spectrometry 2020-08-04 发布 2020-11-01 实施 中华人民共和国农业农村部发布 I 农业农村部公告第323号—28—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 本标准由中华人民共和国农业农村部提出。 本标准由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口 本标准起草单位：农业农村部科技发展中心、中国农业大学。 本标准主要起草人：黄昆仑、张秀杰、马丽艳、李夏莹、张春娇、贺晓云、罗云波。 1 农业农村部公告第323号—28—2020 转基因生物及其产品食用安全检测 抗营养因子 马铃薯中龙葵碱检测方法 液相色谱质谱法 1 范围 本标准规定了马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱液相色谱-串联质谱检测方法。 本标准适用于转基因及非转基因马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱含量的测定 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 马铃薯及其制品中的α-茄碱和α卡茄碱，用乙酸水溶液匀浆提取，提取液经稀释或固相萃取柱净化 后，用高效液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。 4 试剂和材料 除非另有说明，仅使用分析纯试剂；水为符合GB/T 6682规定的一级水。 4.1 试剂 4.1.1 甲醇(CH?OH,CAS 号：67-56-1):色谱纯。 4.1.2 乙腈(CH?CN,CAS 号：75-05-8):色谱纯。 4.1.3 无水乙醇(C?H?O,CAS 号：64-17-5):色谱纯。 4.1.4 甲酸(CH?O?,CAS 号：64-18-6):色谱纯。 4.1.5 冰乙酸(C?H?O?,CAS 号：64-19-7):分析纯。 4.1.6 甲酸铵(CH?NO?,CAS 号：540-69-2):分析纯。 4.2 溶液配制 4.2.1 乙醇溶液(90%乙醇溶液):量取100mL 水，转入1000mL 容量瓶中，用乙醇定容，混匀后备用。 4.2.2 提取溶剂(10%乙酸水溶液):量取100mL 冰乙酸，转入1000mL 容量瓶中，用水定容，混匀后备用。 4.2.3 淋洗液(15%甲醇溶液):量取150 mL 甲醇，转入1000 mL 容量瓶中，用水定容，混匀后备用。 4.2.4 洗脱液：吸取10 mL 甲酸，转入1000 mL 容量瓶中，用90%乙醇溶液(4.2.1)定容，混匀后备用。 4.2.5 流动相A: 称取0.315 g 甲酸铵，用少量水溶解后转入1000mL 容量瓶中，加入1 mL 甲酸，用水 定容，混匀后过0.22μm 滤膜备用。 4.3 标准品 4.3.1 α茄碱(CsHr?NOis,CAS 号：20562-02-1):纯度≥99%。 4.3.2 α卡茄碱(C??Hr?NO??,CAS 号：20562-03-2):纯度≥99%。 4.4 标准溶液配制 4.4.1 α茄碱标准储备液(1.00 mg/mL): 准确称取α-茄碱标准品10.0 mg, 加甲醇溶解并定容至10 mL, 在一18℃以下密封保存，有效期1年。 4.4.2 α-卡茄碱标准储备液(1.00 mg/mL): 准确称取α-卡茄碱标准品10.0mg, 加甲醇溶解并定容至 2 农业农村部公告第323号—28—2020 10mL, 在一18℃以下密封保存，有效期1年。 4.4.3 α茄碱和α-卡茄碱混合标准中间液(100μg/mL): 准确吸取1.00mg/mLα- 茄碱标准储备液、α卡 茄碱标准储备液各1.00mL 于同一容量瓶中，加甲醇定容至10mL, 配成混合标准中间液。在-18℃以 下密封保存，有效期6个月。 4.5 材料 4.5.1 固相萃取柱：