农业农村部公告第323号-29-2020CN.docx

ICS 65.020.01 B 04 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 农业农村部公告第323号一29—2020 转基因生物及其产品食用安全检测 抗营养因子 番木瓜中异硫氰酸苄酯和 草酸的测定 Food safety detection of genetically modified organisms and derived products—The analytical method for anti-nutrient Benzyl isothiocyanate and oxalic acid in papaya 2020-08-04 发布 2020-11-01 实施 中华人民共和国农业农村部发布 I 农业农村部公告第323号—29—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中华人民共和国农业农村部提出。 本标准由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：农业农村部科技发展中心、中国农业大学。 本标准主要起草人：黄昆仑、刘鹏程、马丽艳、李夏莹、贺晓云、周昉、许文涛、罗云波、曾晓漫、张春娇。 1 农业农村部公告第323号—29—2020 转基因生物及其产品食用安全检测 抗营养因子 番木瓜中异硫氰酸苄酯和草酸的测定 1 范围 本标准规定了番木瓜中异硫氰酸苄酯的气相色谱-质谱测定方法和番木瓜中草酸的高效液相色谱测 定方法。 本标准适用于番木瓜中异硫氰酸苄酯和草酸含量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 异硫氰酸苄酯的测定(气相色谱-质谱法) 3.1 原理 试样用水匀浆处理后，匀浆液中的异硫氰酸苄酯经三氯甲烷萃取，用气相色谱-质谱联用仪测定，外标 法定量。 3.2 试剂和材料 除另有规定外，仅使用分析纯试剂；水为符合GB/T 6682规定的一级水。 3.2.1 试剂 三氯甲烷(CHCl?,CAS 号：67-66-3)。 正已烷(C?Hi?,CAS 号：110-54-3)。 3.2.2 标准品 异硫氰酸苄酯(C?H?NS,CAS 号：622-78-6):纯度≥99%。 3.2.3 标准溶液配制 异硫氰酸苄酯标准储备液(1.00 mg/mL): 准确称取异硫氰酸苄酯标准品10.0mg, 加正己烷溶 解并定容至10mL, 配成浓度为1.00 mg/mL 标准储备液，在一18℃下密封保存，有效期1年。 异硫氰酸苄酯标准中间液(100μg/mL): 准确吸取1.00 mg/mL 异硫氰酸苄酯标准储备液 1.00mL 于 1 0mL 容量瓶中，加正己烷定容至刻度，配成浓度为100μg/mL 标准中间液。在一18℃下密 封保存，有效期6个月。 3.2.4 材料 有机相微孔滤膜：孔径0.22 μm。 3.3 主要仪器和设备 3.3.1 气相色谱-质谱联用仪：配电化学离子源(EI)。 3.3.2 电子天平：感量0.01g 和0 . 0001g。 3.3.3 组织捣碎机。 3.3.4 涡旋混合器 3.3.5 高速匀浆机：转速不小于10000 r/min。 3.3.6 离心机：转速不小于10000 r/min。 3.4 试样制备 2 农业农村部公告第323号—29—2020 3.4.1 试样制备 木瓜样品去蒂、皮、籽等，取可食部分，沿纵轴剖开成两半，截成四等份，每份取出部分样品将其切碎， 充分混匀，用四分法取样或直接放入组织捣碎机中捣碎成匀浆，装入洁净的容器内，密封并标明标记。 3.4.2 试样保存 试样应密封冷藏保存，如果不进行立即检测，需一18℃以下冷冻保存。 3.5 分析步骤 3.5.1 提取 准确称取20g 试样(精确至0.01g)于100 mL 烧杯中，加入20mL 水，匀浆2min。 称取匀浆后的样品5 g(精确至0.01g)于50mL 离心管中，准确吸取5mL 三氯甲烷，加入离心管中， 涡旋萃取2 min,6000 r/min 离心5 min。 吸取下层溶液2 mL, 过0.22 μm 微孔滤膜，滤液待测定。 3.5.2 测定 仪器参考条件 a) 色谱柱：毛细管色谱柱 HP-5,30m×0.25 mm,0.25μm,