DB64 1493_2017  豆芽中赤霉素、6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、2，4-滴的测定 液相色谱-串联质谱法.docx

67.050 X04 DB64 宁 夏 回 族 自 治 区 地 方 标 准 DB 64/ T1493—2017 豆芽中赤霉素、6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙 酸、2,4-滴的测定 液相色谱-串联质谱法 2 0 1 7 - 0 1 - 1 9 发 布 2017-04-19实施 宁夏回族自治区质量技术监督局 发 布 I DB64/ T1493—2017 前 言 本标准是按照GB/T1.1-2009 《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则编写。 本标准由宁夏回族自治区食品检测中心提出。 本标准由宁夏回族自治区质量技术监督局归口。 本标准起草单位：宁夏回族自治区食品检测中心。 本标准主要起草人：马桂娟、汤丽华、朱捷、马雪梅、龚慧、谢芳、王鹏、李建勐。 1 DB64/ T1493—2017 豆芽中赤霉素、6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、 2,4-滴的测定液相色谱-串联质谱法 1 范围 本标准规定了豆芽中赤霉素、6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、2,4-滴的液相色谱-串联质谱检测方 法。 本标准适用于豆芽中赤霉素、6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、2,4-滴的残留量分析。 本标准测定豆芽中赤霉素方法检出限为15.0μg/kg;6- 苄基腺嘌呤方法检出限为3.0μg/kg;4- 氯 苯氧乙酸方法检出限为3.0μg/kg;2,4- 滴方法检出限为6.0μg/kg。 2 原理 赤霉素、6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、2,4-滴用乙酸乙腈溶液提取后，采用MgSO?+C18的吸附材 料，将极性较弱的大分子基质干扰物吸附掉，使目标化合物与基质干扰物分离，用高效液相色谱-串联 质谱法测定。 3 试剂和材料 3.1 冰乙酸(优级纯)。 3.2 甲酸(优级纯)。 3.3 乙腈(色谱纯)。 3.4 甲醇(色谱纯)。 3.5氯化钠(优级纯)。 3.6 C18 (适用于QuEChERS方法的填料)。 3.7硫酸镁(适用于QuEChERS方法的填料)。 3.8 乙酸铵(优级纯)。 3.95mmol/L 乙酸铵-0.05%甲酸水溶液；称取0.1925g 乙酸铵(3.8)加200mL 水溶解，加入0.25mL 甲酸(3.2)用去离子水定容至500mL, 混匀。 3.105%乙酸乙腈：吸取5mL 冰乙酸(3.1),加乙腈(3.3)稀释至100mL。 3.11 标准物质：赤霉素、6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、2,4-滴：纯度≥98%。 3.12标准储备溶液(1.0mg/mL): 准确称取赤霉素、6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、2,4-滴0.01g (精 确到0.1mg), 分别放入10mL 容量瓶中用甲醇(3.4)溶解并定容至刻度，混匀。 3.13 标准中间溶液(10.0μg/mL): 分别吸取标准储备溶液(3.12)各1.0mL 于100mL容量瓶中用甲 醇(3.4)溶解并定容至刻度，混匀。 3.14 基质标准工作溶液：准确移取标准中间溶液(3.13)一定体积，用空白基质提取液稀释成浓度为 (μg/L)1.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0、200.0系列标准工作溶液。临用时现配。 4 仪器与设备 2 DB64/ T1493—2017 4.1 高效液相色谱-串联质谱仪，配有电喷雾 (AJS ESI) 离子源。 4.2 分析天平：感量为0.1mg。 4.3 高速冷冻离心机。 4.4 涡旋混匀器。 4.5 均质机。 4.6 氮吹仪。 5 分析步骤 5.1 试样制备 取200g左右样品加入等质量的去离子水，经均质机均质并混合均匀后，应立即测定。 5.2 试样溶液的制备 称取混合均匀的豆芽样品10g (精确至0.01g) 于100mL 离心管中，加入15mL5% 乙酸乙腈(3.10), 涡旋混匀，10000r/min匀浆提取1分钟，加入2g 氯化钠(3.5),再匀浆1分钟，冰水浴中静置5分钟。 在4℃条件下8000r/min 冷冻离心5分钟，上清液备用。 5.3 净化 准确称取0.90gMgSO? (3.7) 和0.15gC18(3.6) 于15mL 离心管中，涡旋混匀。加入5.0mL 上清液， 涡旋1分钟，去除杂质，在4℃条件下8000r/min冷冻离心5分钟。取出后放置室温，再取上清液1.0mL50℃ 下氮吹至干，加入流动相溶解定容至1.0mL, 过0.22 μm 滤膜后，供高效液相色谱-串联质谱仪分析测定