DB64_T 727-2011 马铃薯脱毒基础苗培育技术标准.docx

ICS 65.020.20 B05 宁 夏 DB64 回 族 自 治 区 地 方 标 准 DB 64/T 727—2011 马铃薯脱毒基础苗培育技术标准 2011- 12- 18发布 2011-12-18实施 宁夏回族自治区质量技术监督局 发布 DB64/ T 727—2011 前 言 本标准的编写格式符合GB/T1.1-2009 《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》的要求。 本标准由北方民族大学提出。 本标准由宁夏回族自治区农牧厅归口。 本标准由北方民族大学起草 本标准主要起草人：曹君迈、陈彦云、杨桂琴、郭荣、陈建荣、陈彩芳、冯佩、马登华、祁金涛。 DB64/ T 727—2011 马铃薯脱毒基础苗培育技术标准 1 范围 本标准规定了马铃薯脱毒基础苗培育技术标准的术语和定义、培养的实验室条件、生产技术方法、 脱毒基础苗质量要求。 本标准适用于马铃薯脱毒基础苗培育。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB18133 马铃薯脱毒种薯生产技术规程 DB64/T492-2007 马铃薯种薯生产技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 脱毒苗 应用茎尖分生组织做外植体通过植物组织培养技术获得的、经检测确认不带马铃薯卷叶病毒-PLRV、 马铃薯Y病毒-PVY、 马铃薯X病毒-PVX、马铃薯S病毒-PVS、马铃薯M病毒-PVM、 马铃薯A病毒-PVA和马铃 薯纺锤块茎类病毒-PSTVd的再生试管苗。 3.2 外 植 体 用来进行无菌培养的植物器官、组织、细胞、原生质体等离体材料或用于继代培养的组织培养物。 3.3 脱毒基础苗 用脱毒苗作为基础材料，在人工培养基上培养出的脱毒苗。 4 培养实验室条件 4.1 实验室建造要求及布局 2 DB64/ T 727—2011 实验室位置应坐北面南偏东5℃,南面墙体采用落地玻璃窗，准备室、接种室和培养室用玻璃隔开。 培养室北面墙体张挂反光幕，地面铺反光性好的瓷砖。实验室应具备通风、宽敞、明亮、防滑的准备室， 干燥、清洁、封闭性好的接种室和培养室。准备室与接种室相邻，接种室和培养室设有缓冲区。 4.2 实验器具 选用马铃薯脱毒基础苗液体培养组培瓶和马铃薯脱毒基础苗培养架。 4.3 环境条件要求 4.3.1 光 适宜光强29001ux～4600lux; 光周期12h光/12h暗；光质在马铃薯茎秆呈黄绿色时用白光或淡红光， 马铃薯茎秆呈红绿色时用白光。 4.3.2 温度 适宜温度23℃±2℃。 4.3.3 环境湿度 适宜湿度30%～60%。 4.3.4 pH 值 适宜pH值5.6～6.0。 4.3.5 培养基 采用MS培养基，不添加任何激素。 5 生产技术方法 5.1 培养基母液的配制 按表1要求配制培养基母液。 表1 MS 培养基母液的配制 母液编号 化合物名称 标准用量 (mg/L) 扩大倍数 (倍) 称取量 (mg) 母液定容体积 (ml) 1升培养基吸取品 (ml) 母液1 KNO? 1900 100 190000 5种盐分别充 分溶解后混合 定溶至1000 10 NH?NO? 1690 100 169000 KH?PO, 170 100 17000 MgSO.7H?0 370 100 37000 CaCl?,2H?O 440 100 44000 母液2 MnSO4H?Q 22.3 100 2230 10 3 DB64/ T 727—2011 表1(续) 母液编号 化合物名称 标准用量 (mg/L) 扩大倍数 (倍) 称取量 (mg) 母液定容体积 (ml) 1升培养基吸取量 (ml) 母液2 ZnS?.7H?O 8.6 100 860 7种盐分别充 分溶解后混合 定溶至1000ml 10 H?BO? 6.2 100 620 KI 0.83 100 83 NaMo. 2H?O 0.25 100 25 CuSO. 5H?O 0.025 100 2.5 CoC]s.6H?O 0.025 100 2.5 母液3 Na,-EDTA 37.3 100 3730 2种盐分别充 分溶解后混合 定溶至1000ml 10 FeSO.7H?O 27.0 100 2780 母液4 廿氨酸 2 100 200 4种有机物分 别溶解后再定 溶至1000m 10 盐酸硫胺素VB; 0.1 100 10 盐酸吡哆醇VB? 0.5 100 50 烟酸 0.5 100 50 5.2 培养基母液的保存 配制好的母液分别贴上标签，注明母液名称、扩大倍数或浓度、日期，送于冰箱4℃保存备用。母 液出现霉