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第1页/共41页蛋白质合成一第2页/共41页第四章 生物信息的传递(下) ------从mRNA到蛋白质第3页/共41页translationtranscriptionproteinDNARNAReverse transcription第四章 生物信息的传递(下) ------从mRNA到蛋白质翻译(translation):包含在mRNA分子中以核苷酸顺序形式排列的遗传密码，转变成蛋白质多肽链中氨基酸排列顺序的生化过程，也称蛋白质合成。第4页/共41页第四章 生物信息的传递(下) ------从mRNA到蛋白质 4.1 遗传密码---三联子 4.2 蛋白质生物合成体系 4.3 蛋白质合成的生物学机制 4.4 蛋白质运转机制第5页/共41页 4.1 遗传密码---三联子 4.1.1 三联子密码及其破译 4.1.2 遗传密码的性质第6页/共41页 4.1.1 三联子密码及其破译三联子密码(triplet coden) ：简称密码，指mRNA上每3个核苷酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸，这3个核苷酸称为密码。第7页/共41页 4.1.1 三联子密码及其破译翻译时，从起始密码子开始，沿mRNA从5?至3?方向连续阅读密码子，直至终止密码子为止，生成一条具有特定序列的多肽链--蛋白质。作为基因的产物的蛋白质最终是受基因控制。第8页/共41页4(×)2042=1620(×)43=6420(√) 4.1.1 三联子密码及其破译遗传密码的破译，即确定代表每种氨基酸的具体密码(数目和顺序)。一. 三个核苷酸决定一个氨基酸1. 数学观点：G.Gamov(1904-1968） 第9页/共41页2. Crick,Sydney Brenner的遗传学实验化学诱变剂处理T4噬菌体DNA，DNA发生插入或缺失突变，当连续插入或缺失三个核苷酸时，会导致多肽链中增加或缺失一个氨基酸，但序列不发生改变。第10页/共41页3.病毒的mRNA烟草坏死卫星病毒的外壳蛋白由大约400个氨基酸组成，其相应的mRNA片段包括了1200个核苷酸。第11页/共41页二、确定每种氨基酸的具体密码1.破译的技术基础(1)人工RNA分子的合成1955年Severo Ochoa发现了多核苷酸磷酸化酶（PNP，ploynucleotide phosphorylase），在细胞内降解RNA分子而在试管内可催化合成RNA分子。无需DNA模板并且也与转录没有关系。第12页/共41页1.破译的技术基础(2)无细胞蛋白合成系统 无细胞（或体外）蛋白合成系统：包括蛋白合成的全部必须的细胞成分，但却完全缺少内源mRNA，利用人工合成的RNA分子作为信息转译。无细胞体系中Mg2+浓度很高，人工合成的多聚核苷酸不需起始密码子就能指导多肽的生物合成，读码起始是随机的。 然而，在生理Mg2+条件下，无起始密码子的多核苷酸不能被用作多肽合成的模板。 第13页/共41页2. 遗传密码的破译：确定每种氨基酸的具体密码(1). 以均聚物、随机共聚物和特定序列的共聚物为模板指导多肽的合成(2). 核糖体结合技术第14页/共41页(1). 以均聚物、随机共聚物和特定序列的共聚物为模板指导多肽的合成制备大肠杆菌的无细胞合成体系 在含DNA、mRNA、tRNA、核糖体、AA-tRNA合成酶及其他酶类的抽提物中加入DNase，降解体系中的DNA，耗尽mRNA时，体系中的蛋白质合成即停止，当补充外源mRNA或人工合成的各种均聚物或共聚物作为模板以及ATP、GTP、氨基酸等成分时又能合成新的肽链，新生肽链的氨基酸顺序由外加的模板所决定。 因此，分析比较加入的模板和合成的肽链即可推知编码某些氨基酸的密码。第15页/共41页(1).均聚核苷酸指导均聚肽的合成 1967年5月27日，Marshall Nirenberg和Heiurich Matthaei利用了E. Coli 的无细胞蛋白合成体系首次获得了以下结果：第16页/共41页(2)共聚核苷酸指导多肽的合成 将两种以上的核苷酸随机地渗入来合成RNA分子，在无细胞系统中以这种比例合成的mRNA产生的氨基酸的比例也应是相应的，在无细胞蛋白合成体系中计算各种氨基酸的得出率，可以推测出密码子的组成，从而估计氨基酸密码子。以U. G为例，渗入比例为U(76%)和G(24%)，那么由此随机共聚产生的各种三联体的几率和氨基酸的渗入情况如下：第17页/共41页三联体 几率 相对几率UUU 0.76×0.76×0.76=0.469 100%UUG 0.76×0.76×0.24=0.139 31.6%UGU