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实验肠道致病菌分离鉴定;微生物学实验四;
录像：球菌
操作：1、化脓性球菌分离鉴定（二）
（1）革兰染色
（2）转种甘露醇或血清肉汤
（3）血浆凝固酶实验
（4）触酶实验
2、肠道菌分离鉴定（一）
——粪便标本接种S.S平板
材料：（1）载玻片 1-2 张/人
（2）甘露醇或血清肉汤 1支/人
（3）新鲜兔血浆、生理盐水 各1支/6人
（4）S.S平板 1块/人
（5）粪便标本：伤寒、痢疾、副甲、副乙 1套/教室;了解：肠道致病菌的血清学鉴定
触酶实验、血浆凝固酶实验的原理
掌握：
1. 肠道致病菌分离鉴定的方法、步骤及生化反应
2. 化脓性球菌转种甘露醇或血清肉汤的目的
3. 触酶、血浆凝固酶实验的结果观察;观察上次实验结果、进行分析;抗生素敏感试验; 如果细菌对药物敏感，则在药片周围有抑菌圈形成，敏感度越高抑菌圈直径越大：
20mm：极度敏感
5-20mm：中度敏感
10-15mm：轻度敏感
10mm: 不敏感
无抑菌圈: 耐药;化脓性球菌分离鉴定（二） ;2、操作; 涂片：先在玻片上放一滴生理盐水，然后刮取菌落
在盐水中乳化，涂成直径约为1.0 cm的膜。
干燥：最好在室温中自然干燥，也可在远离火焰上
方微微烘干。但切勿靠火焰以免烤焦标本。
固定：火焰固定。
革兰染色过程：
初染： 结晶紫 1分钟
媒染： 碘液 1分钟
脱色： 95%酒精 半分钟
复染： 稀释复红 半分钟
镜检：球阳杆阴 阳紫阴红 ;葡萄球菌;;结果观察：有大量气泡产生者为阳性。不产生气泡者为阴性。;（3）血浆凝固酶试验;2）操作：玻片法;（4）甘露醇试验或血清肉汤接种;肠道菌分离鉴定（一）; 肠道菌的种类繁多，为成功地检出病原菌，通常选用选择或鉴别培养基。除提供细菌生长所需营养物外，还含有抑菌剂和指示剂。可有选择性抑制某些肠道细菌的生长，指示剂则能鉴别细菌的生化特性。; S.S琼脂培养基中含有胆盐、煌绿和枸橼酸钠等成分，不仅能抑制G+菌的生长，也能抑制肠道非致病菌的生长。;SS琼脂培???基（Salmonella-Shigella agar） ;操作：;1、用无菌接种环挑取少量粪便标本，用划线法 接种于S.S平板上进行分离培养。
2、放置于37oC孵箱内培养18-24小时，观察平板上所生长的菌落，依据其形态大小，透明度和颜色等特点，初步识别致病菌和非致病菌。;化脓性感染采取哪些标本送检有辅助诊断意义？
为什么要用血浆凝固酶试验鉴别致病性与非致病性葡萄球菌？;感谢您的欣赏
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