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双向免疫扩散试验;一 目的要求;二 实验原理;第4页/共21页;沉淀线的特征与位置:
1 抗原、抗体的特异性和浓度,
2 抗原、抗体分子的大小
3 扩散率
当抗原体存在多种成分时,将呈现多条沉淀线以至交叉反应线,因此可用来检查抗原和免疫血清的特异性、纯度或浓度比较抗原之间的异同点,因而应用范围较广。;1.双扩散用于疾病诊断: 以IBD诊断为例,中心孔加IBD标准阳性血清,周围孔分别加IBD标准抗原、生理盐水、待检抗原1.2.3.4。
2.双扩散用于抗体检测: 以免疫鸡IBD抗体检测为例,中心孔加IBD标准抗原,周围孔分别加IBD标准阳性血清、IBD阴性血清、待检血清1.2.3.4。;三 操作步骤;第8页/共21页;2.免疫扩散及结果观察;四 结果记录;五 讨论;实验四 火箭免疫电泳;【目的要求】;【实验原理】;;【操作步骤】;
2. 抗原在稀释板中倍比稀释
1/1 、1/2、1/4、1/8、待测样品;3.打孔、加样火箭电泳试验示意图
待琼脂凝固后,于距玻板一长边10mm处,以3mm孔径打孔器打孔一排,孔距5mm。电泳前各孔中加入抗原液,每孔20μL。
4.电泳:250伏1.5小时(滤纸搭桥)
5.结果判定
电泳结束后,取出琼脂板,加1%鞣酸生理盐水浸泡后30分钟,观察与测定结果。
;四 结果;五 讨论;谢谢观看!
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