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实验四过碘酸雪夫反应演示文稿 当前第1页\共有29页\编于星期四\17点 优选实验四过碘酸雪夫反应ppt 当前第2页\共有29页\编于星期四\17点 细胞化学染色的步骤： 1. 固定：将细胞的生前结构和化学物质保存下来。 2. 显示：通过一系列化学反应形成稳定的有色沉淀。 3. 复染：使各种细胞都显示出来以便于观察。 细胞化学染色的实用价值 一、协助白血病的诊断 1.急性白血病细胞类型的鉴别。 检查顺序：POX PAS NAE+NaF NCE 2.协助慢性白血病的诊断。NAP PAS 二、协助贫血的诊断 1.缺铁性贫血：铁染色 2.再障：NAP 3.铁粒幼细胞性贫血：铁染色 三、鉴别某些容易混淆的细胞以协助诊断 四、协助鉴别良性与恶性的淋巴细胞疾病 五、协助两种感染的鉴别 当前第3页\共有29页\编于星期四\17点 实验四 过碘酸-雪夫反应 (糖原染色) [目的要求] 1．掌握本实验的原理和临床意义。 2．熟悉本实验的操作方法及注意事项。 [实验原理] 糖原中的1，2-乙二醇基经高碘酸氧化后产生醛基，此醛基进而与雪夫 (Schiff) 液作用，使无色品红变为红色的化合物，定位于胞浆中。 [实验器材和试剂] 1．10g／L高碘酸液 2．雪夫 (Schiff) 染液 3．亚硫酸液 4．20g／L甲绿 5．染色架、洗耳球、接水盘及吸水纸。 6．光学显微镜、香柏油、乙醚和擦镜纸。 当前第4页\共有29页\编于星期四\17点 当前第5页\共有29页\编于星期四\17点 当前第6页\共有29页\编于星期四\17点 当前第7页\共有29页\编于星期四\17点 [实验步骤] 1．新鲜血片或骨髓片用95％乙醇固定10min，蒸馏水冲洗，待干。 2．10g／L高碘酸氧化15～20min，蒸馏水冲洗，待干。 3．置雪夫试液室温染色30～60min。 4．用亚硫酸溶液冲洗3次后，以自来水冲洗2～3min，待干。 5．20g／L甲绿复染10～20min。 6．水洗，待干，镜检。 7．结果 (1) 阳性反应：在细胞浆内染红色，呈弥漫状、颗粒或块状。胞核染成绿色。阴性反应，胞浆无色。 (2) 反应强度判断标准： ① 中性粒细胞的分级标准： (－) 胞浆无红色颗粒。 (+) 胞浆内呈淡红色有极少颗粒。 (++) 胞浆呈红色，厚而不透明，或有较少颗粒。 (+++) 胞浆呈深红色，颗粒紧密，但尚有空隙。 (++++) 胞浆呈深紫红色，颗粒紧密，无空隙。? 当前第8页\共有29页\编于星期四\17点 ② 淋巴细胞分级标准： (－) 胞浆内无颗粒。 (+) 胞浆内呈弥散淡红或有少数细颗粒 ( 9个)。 (++) 胞浆内呈弥散较深的红色或有多数细颗粒 (10个)。 (+++) 胞浆内有较粗颗粒或少数小块状。 (++++) 胞浆内呈多数粗颗粒并有大块红色物质。 ? ③ 幼红细胞的分级标准： (－) 胞浆内无颗粒。 (+) 胞浆内有少数分散细小颗粒或浅红色弥漫物质。 (++) 胞浆内有1～10个中等颗粒或弥漫的红色。 (+++) 胞浆内有11～20个较粗颗粒或呈深红色。 (++++) 胞浆颗粒较多，20个以上，并且粗，致密且呈紫红色。 当前第9页\共有29页\编于星期四\17点 ④ 巨核细胞的分级标准： (－) 细胞内没有糖原，但细胞浆内有弥散性着色，此系其它多糖类物质。 (+) 含少量糖原，即含数小块或一大块糖原，糖原常定位于近核膜处。 (++) 胞浆内含有中等糖原，即含许多小块或少数大块糖原，约占胞质的1/3。 (+++) 胞浆内含有大量糖原，呈大块状，其总面积约占胞浆面积的1/2以上。 （＋＋＋＋）胞浆内充满糖原。 (3) 阳性率和阳性积分：根据不同情况的需要，观察同一类细胞100个，求出阳性率的百分比，将百分率与分级数的积相加，其总和即为积分。 当前第10页\共有29页\编于星期四\17点 当前第11页\共有29页\编于星期四\17点 当前第12页\共有29页\编于星期四\17点 当前第13页\共有29页\编于星期四\17点 当前第14页\共有29页\编于星期四\17点 当前第15页\共有29页\编于星期四\17点 当前第16页\共有29页\编于星期四\17点 实验五 过氧化物酶 (POX) 染色 [目的要求] 1．? 掌握本实验的原理和临床意义。 2．? 熟悉本实验的操