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使用Nanovue测定DNA纯度浓度
开机:长按按键板上的键启动仪器,仪器将进行自检程序并进入主界面,按数字键“1”进入life science模式,再按数字键“1”进入DNA模式。按“”键确认。
清洗:使用前,先取超纯水2-10 ul,滴在测试面板的光路上(箭头所指的两个黑点),压下测样头,用擦镜纸轻轻擦去测试面板和测样头上的水珠。
= 3 \* GB3 ③ 调零:吸取2 ul溶剂(溶解待测试样品的溶剂,通常为超纯水),滴在样品光路上(周围有十字的那个圆点)。放下测样头,按“”键调零。此时仪器显示要求再调一次零。抬起测样头,用擦镜纸擦去面板和测样头上的水珠,再次吸取该溶剂2 ul,重复上述调零步骤。
注:实际操作中,加两次溶剂往往很难调到零点。可以取消第二次加溶剂,只是抬起测样头再放下,按“”键调零即可
= 4 \* GB3 ④ 取液上样:抬起测样头,吸取约2 μL样品,滴在面板的样品光路上(十字之间的黑点上)
注意:使用Nanovue时,常规上样体积为2 μL,最低为0.5 μL。
样品中不要进入气泡,最好为球状液滴,如果液体呈平铺状态,需要重新清洗面板。
⑤ 测试:按“”键进行测试扫描。记录OD260nm,OD280nm,OD230nm,DNA浓度(注意记录浓度单位)等相关数据。
注意:建议不要反复升起和降低测样头对一份样品进行多次测试,这样会导致液滴弥散。如果需要重复测试,多次按下 键进行读数。
⑥ 回收样品:如果想保留样品,在结果读取后使用移液器回收样品。
⑦ 擦拭:结果读取后,使用不含棉绒拭镜纸(擦镜纸)擦去测样头和面板上的样品液。面板擦拭方向朝向操作者,测样头擦拭方向向上,避免污染后面的折返光路。
⑧ 清洗,同第二步。注意:每测一个样品都要清洗。
⑨ 关机:长按电源键关闭。
Note:
1 警告!强光源!严禁直接观察任何紫外/可见光分光光度计发出的光线。
2 当测试值用于计算浓度时,需要考虑光路长度。NavoVue能够以0.2 mm或0.5 mm光路长度测试样品。对于浓度低的样品应采用0.5 mm光路长度,对于浓度高的样品应采用 0.2 mm光路长度。
DNA纯度判断:OD260/OD280, 介于1.7-1.9,说明DNA纯度好;1.7可能有蛋白,酚等污染,2.0说明DNA可能有降解,或者含有RNA。
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