色谱法分离的基本原理.pptVIP

通过选择因子α把实验测量值k与热力学性质的分配系数K直接联系起来，α对固定相的选择具有实际意义。 如果两组分的K或k值相等，则? 2,1 =1，两个组分的色谱峰必将重合。两组分的K或k值相差越大，则越可能分离得好。 第三十页，共七十四页，2022年，8月28日 19-3 色谱法基本理论 图19-3 示出了A、B两组分沿色谱柱移动时，分离与浓度扩散的基本情况。 由图可知：溶质A和B在沿柱移动时，随着两组分在色谱柱中移动距离的增加有两种现象发生： 两峰间的距离逐渐变大，同时，每一组分的浓度轮廓（即区域宽度）也慢慢变宽。显然，两峰间距离变大与区域扩宽是一对矛盾。 第三十一页，共七十四页，2022年，8月28日 第三十二页，共七十四页，2022年，8月28日 若要使A、B组分完全分离，必须满足以下三点： 第一，两组分的分配系数必须有差异； 第二，区域扩宽的速率应小于区域分离的速度； 第三，在保证快速分离的前提下，提供足够长的色谱柱。 一个完善的色谱理论应该能够较好的建立起能准确描述这两种情况变化的数学模型。塔板理论与速率理论均以色谱过程中的分配系数恒定为前提分别从不同的角度讨论了色谱分离问题，故都称线性色谱理论。 第三十三页，共七十四页，2022年，8月28日 一、塔板理论 将一根色谱柱比作一个精馏塔，即色谱柱的分离过程是在一系列连续、相等的水平塔板上进行的精馏。每一块塔板的高度用H表示，称为塔板高度，简称板高。 塔板理论假设：在每一块塔板上，溶质在两相间很快达到分配平衡，然后随着流动相按一个一个塔板的方式向前移动。 第三十四页，共七十四页，2022年，8月28日 对于一根长为L的色谱柱，溶质平衡的次数应为： n = L / H n称为理论塔板数。与精馏塔一样，色谱柱的柱效随理论塔板数n的增加而增加，随板高H的增大而减小。 第三十五页，共七十四页，2022年，8月28日 塔板理论指出： 第一，当溶质在柱中的平衡次数，即理论塔板数n大于50时，可得到基本对称的峰形曲线。在色谱柱中，n值一般很大，如气相色谱柱的n约为103 ~ 106 ，因而这时的流出曲线可趋近于正态分布曲线。 第二，当样品进入色谱柱后，只要各组分在两相间的分配系数有微小差异，经过反复多次的分配平衡后，仍可获得良好的分离。 第三十六页，共七十四页，2022年，8月28日 式中tR 与Y1/2 ( Y )应采用同一单位(时间或距离)。 从公式可以看出，在tR 一定时，如果色谱峰很窄，则说明n越大，H越小，柱效能越高。 在实际工作中，由上式计算出来的n和H值，有时并不能充分地反映色谱柱的分离效能，因为采用tR计算时，没有扣除死时间tM。 第三，n与半峰宽及峰底宽的关系式为： （19-17） 第三十七页，共七十四页，2022年，8月28日 有效板高 ： H有效 = L / n有效 因为在相同的色谱条件下，用不同的物质测量后计算出来的塔板数不一定相同。因此，在说明柱效时，除注明色谱条件外，还应指出用什么物质进行测量。 所以常用有效塔板数n有效表示柱效： （19-18） （19-19） 第三十八页，共七十四页，2022年，8月28日 例 已知某组分峰的峰底宽为40 s，保留时间为400 s ，计算此色谱柱的理论塔板数。 解：n = 16 ( tR / W)2 = 16 ? (400 / 40)2 = 1600 块 例2 P354 第三十九页，共七十四页，2022年，8月28日 塔板理论是一种半经验性理论。它用热力学的观点定量说明了溶质在色谱柱中移动的速率，解释了流出曲线的形状，并提出了计算和评价柱效高低的参数。 但是，色谱过程不仅受热力学因素的影响，而且还与分子的扩散、传质等动力学因素有关，因此塔板理论只能定性地给出板高的概念，却不能解释板高受哪些因素影响；也不能说明为什么在不同的流速下，可以测得不同的理论塔板数，因而限制了它的应用。 第四十页，共七十四页，2022年，8月28日 二、速率理论 1956年荷兰学者van Deemter（范第姆特）等在研究气液色谱时，提出了色谱过程动力学理论——速率理论。他吸收了塔板理论中板高的概念，并充分考虑了组分在两相间的扩散和传质过程，从而在动力学基础上较好地解释了影响板高的各种因素。 该理论模型对气相、液相色谱都适用。van Deemter方程的数学简化式为 H = A + B / u + C u 式中u为流动相的线速度；A、B、C、为常数，分别代表涡流扩散系数、分子扩散项系数、传质阻力项系数。 第四