农药的分类已及其代谢产物的测定.pptVIP

将滤液在45℃下，缓缓通入N2气，以挥去有机溶剂。所得残留物即奶脂。称重，并计算奶脂百分含量。 用己烷分数次洗出奶脂（控制量约为50mg脂肪/ml己烷），定容至。 将洗出液置具塞试管中，加入5ml浓硫酸，上下颠倒25次左右，去塞，用聚乙烯薄膜封口，离心（2000rpm）3分钟。取己烷层供色谱分析。 农药的分类已及其代谢产物的测定 4.血液与尿液 血液与尿液样品的预处理方法基本上与人乳样品预处理方法相同，只是取样量和所用各种试剂量需根据样品用量按比例作相应改动。 农药的分类已及其代谢产物的测定 （2）样品测定 取处理后的样品10μl注入色谱柱。 常采用外标法对样品进行定性定量测定。 将色谱纯标准物质分别用己烷溶解并稀释至10ug/ml有机氯农药，作为贮备液。临用时配制成，2，10，50，200，1000 ng/ml的标准系列，取2μl进样。 农药的分类已及其代谢产物的测定 4．注意事项 （1）所用玻璃器具需彻底清洗，最后用丙酮或己烷冲洗，以去除污染。 （2）萃取处理后的样品要彻底脱水，否则在挥干时油水相混不易排除水分，要去除水分则要提高挥干温度，而使低沸点有机氯农药严重损失。 （3）样品加硫酸净化量要足。操作时颠倒混合，不宜振荡混合，否则会产生胶状混悬物，不易离心分离。 农药的分类已及其代谢产物的测定 第三节 拟除虫菊酯类杀虫剂 拟除虫菊酯类 (Synthetic pyrethroids) 是仿效天然除虫菊化学结构的合成农药，其分子由菊酸和醇两部分构成。 农药的分类已及其代谢产物的测定 拟除虫菊酯主要用于农业、家庭用杀虫剂 现我国使用的有20几种，常用的有氯氰菊酯、溴氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯菊酯和胺菊酯等。 农药的分类已及其代谢产物的测定 一、理化特性 绝大多数为粘稠油状液体，呈黄色或黄褐色，也有少数为白色结晶。 易溶解于多种有机溶剂，难溶于水，大多不易挥发，在酸性溶液中稳定，遇碱则分解失效。 在化学结构上包含多个异构体。 农药的分类已及其代谢产物的测定 根据分子结构中是否含有氰基，可分为Ⅰ型（分子中不含α-氰基）和Ⅱ型（在α-碳原子位置含α-氰基） Ⅰ型化合物的基本结构 Ⅱ型化合物的基本结构 氯菊酯 氯氰菊酯 农药的分类已及其代谢产物的测定 五、全血胆碱酯酶活性的测定 乙酰胆碱酯酶（真性胆碱酯酶） 丁酰胆碱酯酶（拟胆碱酯酶） 有机磷农药中毒时，主要是乙酰胆碱酯酶活性受抑制。 体内的胆碱酯酶 农药的分类已及其代谢产物的测定 当受一种以上有机磷农药影响、且又不明是何（几）种有机磷农药时，可考虑采用哪些测定方法？ 全血胆碱酯酶活性的测定 GC-MS 思考 农药的分类已及其代谢产物的测定 测定方法：有简易测定法、滴定法、酸度法和比色法等，其中较为常用的是三氯化铁分光光度法 。 电化学分析法、荧光法以及放射测量法 农药的分类已及其代谢产物的测定 （一）三氯化铁分光光度法 1. 原理 乙酰胆碱 胆碱和乙酸 剩余的乙酰胆碱 + 碱性羟胺 乙酰羟胺 + 三氯化铁 红棕色羟肟酸铁络合物 血液胆碱酯酶 水解 被水解的乙酰胆碱 酸性 终止反应后 剩余的乙酰胆碱 颜色深浅与剩余乙酰胆碱的量成正比，于波长520nm比色定量 农药的分类已及其代谢产物的测定 反应式如下： 农药的分类已及其代谢产物的测定 2.样品采集和处理 用血色素管取40μI耳垂血，注入盛有磷酸缓冲液的比色管中； 若不能立即测定，则取静脉血，注入预先含肝素钠抗凝剂的比色管中，混匀，置于4℃冰箱中可保存l周。 农药的分类已及其代谢产物的测定 3.测定 （1）标准曲线的绘制 （2）样品测定 P116中间 农药的分类已及其代谢产物的测定 4.注意事项 1．采血时不应挤压耳垂。因为本法是同时测定血球真性胆碱酯酶和血清假性胆碱酯酶；测得的血液胆碱酯酶活性值中，真性胆碱酯酶占85％。 2.乙酰胆碱水解的温度和时间对测定结果影响很大，应严格控制。 T：37℃±0.5℃ 时间：准确反应30min 农药的分类已及其代谢产物的测定 3．加碱性羟胺溶液和1+2盐酸时，必须严格控制振摇时间，使反应彻底，否则影响测定结果。 4．加三氯化铁溶液形成的棕色羟肟酸铁络合物易褪色，故必须在20min内比色完毕。 5．计算胆碱酯酶活性百分数，应以本地区正常人全血胆碱酯酶活性为基准。各地区测定正常值，例数不应少于30人。 农药的分类已及其代谢产物的测定 （二）DTNB分光光度法 1.原理 硫代乙酰胆碱