薄层层析常用显色剂配制及显色方法.docx

碘： 适用于不饱和或者芳香族化合物 配制方法：在 100ml 广口瓶中，放入一张滤纸，少许碘粒。 或者在瓶中，参加 10g 碘粒，30g 硅胶 高锰酸钾 适用于含复原性基团化合物，比方羟基，氨基，醛 配制方法 ：1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期 3 个月 磷钼酸(PMA) 广谱 配制方法 ：10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇 紫外灯 适用于含共轭基团的化合物，芳香化合物 硫酸铈生物碱 配制方法：10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液 氯化铁 苯酚类化合物 配制方法：1% FeCl3+ 50% 乙醇水溶液. 桑色素(羟基黄酮) 广谱, 有荧光活性 配制方法：0.1% 桑色素+甲醇 茚三酮 适用于氨基酸 配制方法：1.5g 茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸 二硝基苯肼(DNP) 适用于醛和酮 配制方法：12g 二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇 香草醛(香兰素) 广谱 配制方法：15g 香草醛 + 250mL 乙醇 +2.5mL 浓硫酸 溴甲酚绿 适用于羧酸，pKa=5.0 配制方法 ：在 100ml 乙醇中，参加 0.04g 溴甲酚绿，缓慢滴加 0.1M 的 NaOH 水溶液，刚好消灭蓝色即至。 钼酸铈广谱 配制方法：235 mL 水 + 12 g 钼酸氨 + 0.5 g 钼酸铈氨 + 15 mL 浓硫酸 茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1 广谱 配制方法：135 乙醇 + 5 mL 浓硫酸 + 1.5 mL of 冰醋酸 + 3.7 mL 茴香醛，猛烈搅拌，使混合均匀. 茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2 适用于萜烯，桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine) 配制方法：茴香醛:HClO4:丙酮:水 (1:10:20:80) 胺类物质常用的是： 胺类物质常用的是： 〔1〕磷钼酸显色剂：磷钼酸 5%-10% 乙醇溶液，淡黄色，久置变为浅绿色，不影响使用。浸板或喷板，加热，浅黄色背景，复原性物质显蓝绿色斑点，假设斑点太浓，可能显深黄色。 〔1〕磷钼酸显色剂：磷钼酸 5%-10% 乙醇溶液，淡黄色，久置变为浅绿色，不影响使用。浸板或喷板，加热，浅黄色背景，复原性物质显蓝绿色斑点，假设 斑点太浓，可能显深黄色。 〔2〕CAM 显色剂:钼酸铵 9.6g,硫酸铈 0.4g,10%硫酸水溶液 200ml,混匀，极淡的黄色溶液，棕色瓶密闭保存，喷板，加热，白色背景，复原性物质显深蓝色斑 点。 显色的方法各种各样，主要依据化合物的性质选择不同的显色方法。很多关于植物有效成分提取与分别的书上都有介绍，通用的有碘、硫酸乙醇、香草醛－硫酸 等，固然还有很多专用的显色剂，如：溴甲酚绿使有机酸显黄色，三氯化铁使酚羟基显蓝色，碘化铋钾使生物碱显桔黄色..... 显色剂化合物 苯胺邻苯二甲酸酯 碳水化合物，糖类 溴甲酚绿羧酸 二甲氨基苯甲醛 氨基酸，多肽 磷钼酸苯酚类 磷钼酸苯酚类 假设丹明 类酯类 薄层层析常用显色剂配制及显色方法 薄层层析常用显色剂配制及显色方法 附录 附录 1 薄层层析及纸层析常用显色剂配制及显色方法通用试剂 重络酸钾-硫酸:检查一般有机物. 喷洒剂:5 克重络酸钾溶于 100 毫升 40%硫酸中. 薄层检查:喷洒后加热到 150℃至班点消灭 荧光素-溴:检查不饱和化合物 喷洒剂:0.1 克荧光素溶于 100 毫升乙醇中溴试剂:5%的溴的四氯化碳溶液 喷洒后处理:喷洒荧光素溶液后,放置存有溴溶液的缸内,可于紫外线分析灯下检查荧光,荧光素与溴化和成曙红(Eosin)(无萤光),而不饱和化合物则成溴加成物,保存了原有荧光;假设点样较多,则呈黄色斑点,底板呈红色. 碘:检查一般有机物. 方法:a 层析谱放密闭缸内或瓷盘内，缸内预先放有碘结晶少许，大局部有机化合物呈棕色斑点。 B 层析谱放碘蒸气中 5 分钟〔或喷 5％碘的氯仿溶液〕取出置空气中待过量的碘蒸气全部挥发后，喷 1％淀粉的水溶液，斑点转成蓝色。 硫酸：通用 喷洒剂：5％的浓硫酸乙醇溶液，或 15％浓硫酸正丁醇溶液，或浓硫酸－醋酸〔1：1〕 喷洒后处理：空气中枯燥 15 分钟，再热至 110℃直至消灭颜色或荧光。 硝酸银－氢氧化铵〔Tollen-Zaffaroni〕试剂：检查复原性物质。溶液 I : 0.1%N 硝酸银; 溶液 II: 5N 氢氧化铵 喷洒剂: I 和 II 以 1:5 混合(临用前混合) 喷洒后处理: 105℃加热 5~10 分钟,至深黑色斑点消灭. 磷钼酸或磷钨酸,硅钨酸:检查复原性物质,类脂体,生物碱,甾体喷洒剂: 5~10%磷钼酸或磷钨酸或硅钨酸乙醇溶液 喷洒后处理: 120℃加热至