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核酸合成转录第1页/共53页第2页/共52页第2页/共53页 DNA的大小与基因 结构基因(structure gene)： DNA分子中能转录出RNA的区段 1、重复 2、重叠 3、不连续第3页/共52页第3页/共53页2、 DNA的不对称转录 .DNA双链上，仅一股链转录，另一股不转录。转录方向5’ 3’模板链图13-1第4页/共53页第4页/共52页模板链：反意义链（antisense strand，(-)链）—— 以该链中的DNA碱基顺序指导RNA的合成即被转录的那条DNA链。编码链：有意义链（sense strand ，（+）链）——不被转录的那条DNA链，但其碱基顺序除T代替U外，其余与mRNA相同。第5页/共53页第5页/共52页5’-----GCAGTACATGTC-----3’编码链 DNA3’-----CGTCATGTACAG-----5’模板链5’-----GCAGUACAUGUC-----3’ mRNAN ------Ala--Val--His--Val------C蛋白质有意义链与反意义链并非固定不变。 .转录方向都是5’ 3’第6页/共53页第6页/共52页 3、RNA聚合酶——依赖DNA的RNA聚合酶（DNA-dependent RNA polymerase,DDRP） 以DNA为模板，催化2个游离的NTP形成3’，5’-磷酸二酯键第7页/共53页第7页/共52页14.2 原核生物的转录 14.2.1 大肠杆菌RNA聚合酶的组成（1）全酶(holoenzyme) 由4种(5个)亚基α2ββ’σ组成（2）核心酶(core enzyme) α2ββ’ ，参与转录的全过程（3）σ亚基（起始亚基） 亦称σ因子（σ factor)—转录辅助因子 识别启动子 ω亚基功能未知第8页/共52页第8页/共53页?大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图?????起始因子核心酶(α2ββ?)全酶(α2ββ? ?)β? ——和模板DNA结合β ——起始和催化聚合反应α ——酶的装配、结合启动子等第9页/共52页第9页/共53页亚基α2ββ’σ全酶核心酶决定哪些基因被转录结合底物，形成磷酸二酯键（催化）结合模板（开链）（核心酶参与转录全过程）识别起始点启动子（延长时脱落）功能第10页/共53页第10页/共52页第11页/共52页第11页/共53页14.2.2 原核生物的启动子（promoter）1、启动子 RNA聚合酶全酶识别、结合、开始转录的DNA序列（双链） 转录因子RNA聚合酶起始转录所需要的辅助因子（蛋白质）第12页/共52页第12页/共53页 原核生物启动子的特点:(1)DNA序列在转录起始点的5’端区(上游区)(2)-10bp处 -TATAAT- (Pribnow box)(3)-35bp处 -TTGACA-第13页/共52页第13页/共53页14.2.3 原核生物RNA的转录过程14.2.3.1 模板的识别第14页/共52页第14页/共53页14.2.3.2 原核生物的转录起始σ亚基辨认-35区（结合松弛）RNA pol 全酶移向-10区（结合紧密）5’-pppGpN（A）-OH-合成第一个磷酸二酯键σ亚基脱落转录起始复合物RNA pol(αββ′σ ) —DNA—pppGpN-OH转录起始不需引物！16/50第15页/共53页第15页/共52页RNA聚合酶保护区+1终止点结构基因翻译开始转录开始-35-1010编码链PurineTTGACATATAAT（Pribnow box）转录起始区辨认结合区12/50第16页/共52页第16页/共53页RNA聚合酶σ因子识别及结合启动子，延长时脱落不参与转录过程，是转录辅助因子识别位点：启动子-35区、-10区第17页/共52页第17页/共53页结合过程： 闭和的启动子复合体RNA聚合酶（全酶）中的σ因子在DNA双链上迅速、随机滑动，寻找到启动子-35区，形成疏松的复合物，DNA双链未解开。开放的启动子复合体RNA聚合酶（全酶）移向-10区和转录起始第18页/共52页第18页/共53页14.2.3.3 延长---- 转录泡RNA聚合酶（核心酶）　◆与DNA模板紧密结合，沿3’ 5’方向移动　◆解旋作用：DNA解开　◆聚合功能（不具外切酶功能） 杂交螺旋 ◆ RNA-DNA形成杂交螺旋 ◆ 转录产物RNA沿5’ 3’方向延长第19页/共53页第19页/共52页第20页/共53页第20页/共52页第21页/共52页第21页/共53页See Movie 第22页/共52页第22页/共53页14.2.3.4 转录终止：终止子和终止因子 转录至模板某一位置 停止形成磷酸二酯键 RNA—DNA杂交链解开 DNA解链的部分重新形成双螺旋 RNA聚合酶离开DNA