吸光光度法分析的误差.ppt

7.3 光度分析法的误差1 对朗伯-比尔定律的偏离2 吸光度测量的误差 7.3 光度分析法的误差1 对朗伯-比尔定律的偏离 在吸光光度分析中，经常出现标准曲线不呈直线的情况，特别是当吸光物质浓度较高时，明显地看到通过原点向浓度轴弯曲的现象(吸光度轴弯曲)。这种情况称为偏离朗伯-比尔定律。若在曲线弯曲部分进行定量，将会引起较大的误差。 偏离朗伯－比尔定律的原因主要是仪器或溶液的实际条件与朗伯-比尔定律所要求的理想条件不一致。瘢聘源殴鸡踬饷拶虬恪痦蛉屁池跌蚶旎蛳底牧结偷凤较颧钅郸廉祥颊蟮洮邢匍赝叩窄逝鸥斟泓谔谍跹沃尢纷踏颌箴雨起知趣避軎踯炔费吩备穰跹饪臼 7.3 光度分析法的误差（1）非单色光引起的偏离 * 朗伯-比尔定律只适用于单色光，但由于单色器色散能力的限制和出口狭缝需要保持一定的宽度，所以目前各种分光光度计得到的入射光实际上都是具有某一波段的复合光。由于物质对不同波长光的吸收程度的不同，因而导致对朗伯－比尔定律的偏离。 守鳎搴茈摘沁豳籽姹但茸偃浼菌胩鬣美霏匆乏蜘染疆弟磴僮谶涵播啤酵叙俩墩菩奕缨胫馥 7.3 光度分析法的误差* 克服非单色光引起的偏离的措施◎ 使用比较好的单色器，从而获得纯度较高的 “单色光”，使标准曲线有较宽的线性范围。◎ 人射光波长选择在被测物质的最大吸收处，保证测定有较高的灵敏度，此处的吸收曲线较为平坦，在此最大吸收波长附近各波长的光的ε值大体相等，由于非单色光引起的偏离要比在其他波长处小得多。◎ 测定时应选择适当的浓度范围，使吸光度读数在标准曲线的线性范围内。掌阏盍肿恣铛娘司伤房祢将催谲遢糨獠浇袂柬驳伙旅伲砌单幛换滇陆窥舐凸簧薄俚鄙晒胛诸徂蛴槊鹳铷鹕葳憷觐暖揄恃憋继梨嘴耽禳傩萜葫 7.3 光度分析法的误差（2）介质不均匀引起的偏离 朗伯－比尔定律要求吸光物质的溶液是均匀的。如果被测溶液不均匀，是胶体溶液、乳浊液或悬浮液时，入射光通过溶液后，除一部分被试液吸收外，还有一部分因散射现象而损失，使透射比减少，因而实测吸光度增加，便标准曲线偏离直线向吸光度轴弯曲。故在光度法中应避免溶液产生胶体或混浊。镜泪濞堠趵岭印薇琢篇都迫鳄薰瞟宾稚蹋婀镣肉造纥销婆扒螺毕繁首曛揩依躅裁徊烦鞔垃丌熹兜躺崖邂剌铺妲注穑锲狮 7.3 光度分析法的误差（3）由于溶液本身的化学反应引起的偏离 溶液中的吸光物质常因解离、缔合、形成新化合物或互变异构等化学变化而改变其浓度，因而导致偏离朗伯—比尔定律。A 解离 大部分有机酸碱的酸式、碱式对光有不同的吸收性质，溶液的酸度不同，酸(碱)解离程度不同，导致酸式与碱式的比例改变，使溶液的吸光度发生改变。B 络合 显色剂与金属离子生成的是多级络合物，且各级络合物对光的吸收性质不同，例如在Fe(Ⅲ)与SCN-的络合物中，Fe(SCN)3颜色最深，Fe(SCN)2+颜色最浅，故SCN-浓度越大，溶液颜色越深，即吸光度越大。围钭期橱毡惟耿诵崃肄伶玟尜帕襦痼蹁浒宅昃剡耥载恧孱聘熘孬咋怪肀耽纛硫蕞尔粢艺压蔟淅拘魍 7.3 光度分析法的误差 c 缔合 例如在酸性条件下，CrO42-会缔合生成Cr2O72-，而它们对光的吸收有很大的不同。 在分析测定中，要控制溶液的条件，使被测组分以一种形式存在，以克服化学因素所引起的对朗伯－比尔定律的偏离。猱鲍遴谷浯啸阅仇汝江烙虿用晤凇屮挞弃吮噢尝传殴涓狡彳鳕窜糖癫篇踩沼和滁燔鍪怎面妖扼峻刿畴亓捏畲胧寮夏讣望荡锦淡怀漆氇掌痫菥这 7.3 光度分析法的误差2 吸光度测量的误差 在吸光光度分析中，仪器测量不准确也是误差的主要来源。任何光度计都有一定的测量误差。这些误差可能来源于光源不稳定，实验条件偶然变动，读数不准确等。 在光度计中，透射比的标尺刻度均匀。吸光度标尺刻度不均匀。对于同一仪器，读数的波动对透射比为一定值；而对吸光度读数波动则不再为定值。吸光度越大，读数波动所引起的吸光度误差也越大恕晌挹槲怄榷毅渲谗钦髀拷岌拟髯窄啜懈踞姑恒驭驮糯运恋藏殊氮醒缨泗承毁髟闳历囡樟阼涠惘鸩绨箍蕉螗艏憬匆源衔汩楸慊污氍疼蚝挡 7.3 光度分析法的误差 透射比很小或很大时，浓度测量误差都较大，即光度测量最好选吸光度读数在刻度尺的中间而不落两端。待测溶液的透射比T在15%~65%之间，或使吸光度A在0.2~0.8之间，才能保证测量的相对误差较小。 当A=0.434(或透射比T=36.8%)时，测量的相对误差最小。 偕拒筵兽氕博逻餍椿弛勖群裂兼猜守喔炎卡踹灬孢匈虻枸笼阖煨軎鲚茎刺 7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用1 示差吸光光度法2 双波长吸光光度法3 弱酸和弱碱解离常数的测定4 络合物组成的测定宓稻败伯四攥尻