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流式细胞仪介绍第1页/共51页第2页/共51页流式细胞仪产品介绍第3页/共51页主要内容流式细胞仪基本原理MACSQuant流式的性能流式的竞争分析第4页/共51页流式细胞仪基本原理第5页/共51页流式细胞术的概念 流式细胞术（FCM）： 就是对在高速流动的鞘液包括下的细胞、粒子进行分析和分选的技术，这种细胞或粒子是经过特异荧光标记的。其特点是测量速度快，每秒钟能测数千个乃至上万个细胞，且可进行多参数测量。第6页/共51页流式细胞术发展趋势单纯到复杂检测荧光参数定量手动到自动荧光试剂第7页/共51页流动室层流激光鞘液鞘液注射口细胞样本流式细胞检测原理电子计算机检测器液流 光源第8页/共51页Forward Light Detector ? Cell Surface AreaIncident Light Source细胞可被检测的参数(无探针标记)散射光信号: 细胞内在的结构参数细胞大小 前向角散射 (FSC)细胞内部颗粒性 侧向角散射 (SSC) 第9页/共51页相对荧光强度（FL） (需探针标记) 是细胞或细胞上的荧光染料被激光激发后发射出的荧光，不同的荧光染料其发射波长不同。 区分阴阳性：通过荧光强度可将同一个细胞群体中的有荧光标记的细胞与无荧光标记的细胞区分开来。 区分阳性强弱：也可以将阳性细胞中的高FL的细胞与低FL的细胞区分开来。第10页/共51页如何看流式图散点图 密度图直方图二维等高图图 报告中常见的几种流式细胞图第11页/共51页流式细胞术的应用 流式细胞术在细胞生物学中的应用 染色体核型分析　在分子遗传学领域中的应用 用于性别的预选择 在微生物学中的应用在细胞周期研究中的应用 流式细胞术在医学中的应用在免疫学中的应用　流式细胞术在肿瘤学上的应用在血液学研究中的应用 流式细胞术新的应用第12页/共51页流式细胞仪的临床应用HIV免疫分型，CD4绝对计数白血病和淋巴瘤的免疫分型肿瘤的细胞周期和倍体分析网织红细胞计数细胞移植的交叉配型和免疫状态监测干细胞计数残量白血病细胞检查HLA-B27检查血小板功能及相关疾病第13页/共51页临床意义了解在不同情况下体内免疫功能状态辅助临床疾病的诊断探索疾病的发病机理、病程、预后监测、指导临床治疗方案免疫系统疾病免疫缺陷病，AIDS移植病人排斥反应或移植物抗宿主反应的检测肿瘤病人化疗后免疫力检测第14页/共51页流式细胞仪的科研应用树突细胞研究干细胞研究癌症病人的多药耐药性细胞周期和细胞凋亡流式细胞术与分子生物学研究细胞系的鉴定细胞内蛋白的分析细胞膜电位测定细胞内钙离子测定第15页/共51页流式细胞仪潜在客户医院：血液科，检验科，风湿免疫病科，肿瘤科，细胞治疗科,开展移植（肝肾）的科室。科研院所及大专院校：免疫系或免疫实验室，中心实验室，分子生物学室，肿瘤研究所，血液病研究所。第16页/共51页MACSQuant流式细胞仪——细胞分析的里程碑第17页/共51页多参数细胞分析三激光紫色 (405 nm) 40 mW蓝色 (488 nm) 25 mW红色 (635 nm) 20 mW 9个光学参数FSC/SSC + 7 个荧光通道MACSQuant光学参数Excitation (nm)Optical channelFiltersFluorochromes405 nmFL1450/50VioBlue?/PacificBlue ?488 nmFL2525/50FITCFL3585/40PEFL4655-730PI/7-AAD/PE-Cy5.5/PerCPFL5750(LP)PE-Cy7635 nmFL6655-730APCFL7750(LP)APC-Cy7488 nmSSC/FSC488/10FSC/SSC第18页/共51页MACSQuant光路系统第19页/共51页流式细胞仪基本特征MACSQuant流式细胞仪的创新特性： 集成，台式数字化流式细胞仪强大并且直观的软件多参数：3激光，9个参数（FSC,SSC,FL1-7)12寸触摸屏（内置）不同用户登录模式，可用密码进行保护2种不同的模式（针对有丰富经验和无流式经验的人员）分析速度可达10000个细胞/秒,无需计数微珠进行绝对计数不同的流速控制：25/50/100uL/分钟自动化处理样本，自动进样，自动清洁，自动补偿,自动标记矩阵补偿和脱机补偿小巧（60X35X40cm）、低噪、低热。 第20页/共51页A new milestone in cell analysisMACSQuant? 分析仪功能强大、操作简单的多参数细胞分析的理想工具 (高端仪器 – 操作简单 – 多种自动化选择) 细胞富集系统绝对计数，无需微珠自动补偿自动进样自动标记第21页/共51页MACSQuant流式细胞仪独有特征：高灵敏度地分析稀有细胞MA