菊花组织培养.docx

菊花的组织培养一、植物组织培养的基本过程： 1.植物组织培养的优点 （31 页） 植物组织培养的起点 终点 （31 页） 植物组织培养的概念 （32 页课题背景）。 植物组织培养原理 细胞全能性 （记书上） 细胞全能性概念： 细胞的全能性是指已分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能。（记书上） 细胞全能性原因： 是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质 ,都有发育成为完整个体所必需的全部基因 （记书上） 相关概念： ⑴细胞分化： 细胞分化实质（记书上）：基因的选择性表达 ⑵脱分化： ⑶再分化：（4）愈伤组织特点 画出植物组织培养的流程图： 离体器官脱、分化 再分化 组织或细胞愈伤组织 根、芽 植物体 二 影响植物组织培养的因素：（33 页看书背） 材料的种类、年龄及保存时间长短等 培养基 植物激素 PH、温度、光照等条件三、实验操作 （一）制备 MS 固体培养基 （二）外植体消毒： 外植体的概念： 注意：对外植体进行表面消毒时，既要 考虑 的消毒效果，又要考虑 。 选取菊花茎段时，要取 。菊花茎段用 流水冲洗后可加 ，用软刷轻轻刷洗。再用 吸干外植体表面的水分， 放入 中摇动 2-3 次，取出外植体，吸干，再用 消毒， 在 至少清洗 次， 漂净 。 （三）接种 接种前，用 将工作台擦拭一遍，再点燃酒精灯， 此后，所有的接种操作都必须在 旁进行，并且每次使用器械后，都需要用 灭菌。 左手 右手 ，并将封口膜 ，以避免 。左手 ，使瓶口 ，右手 ，插入时，应注意 。不要 。每瓶接种 块外植体。 （四）培养 接种后的锥形瓶最好放在 中培养，培养期间应 。培养温度控制在 ，并且 。 （五）移栽 在移栽试管苗之前应 ，然后用 清洗根部的培养基，将幼苗移植到 等环境下生活一段时间， 等幼苗长壮后再移栽到土壤中。 （六）栽培 将幼苗移栽后，每天 ，适时浇水，施肥，直至 。 （一）旁栏思考题 你能说出各种营养物质的作用吗？同专题 2 中微生物培养基的配方相比，MS 培养基的配方有哪些明显的不同？ 答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压； 甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养 需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培 养不同，MS 培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？ 答：教师可以安排学生分组，做不同的材料或配方， 最后分别汇报成果。但每种材料或配方至少要做一组 以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的 装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培 养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。 （二）练习 1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性 差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培 养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真 菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会 导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要 条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱 分化和再分化。