基因疫苗的学习教案.pptxVIP

基因疫苗的学习教案;教学目的与要求： 了解疫苗概念、发展和分类 了解基因疫苗的优缺点 了解FDA已进入临床前试验的DNA疫苗 了解克服基因疫苗缺陷、提高免疫效率的策略 介绍教研室有关疫苗研究的最新进展和实验结果 ;一、疫苗概念 凡具有抗原性、接种机体后可诱导产生特异性自动免疫力，并可抵御传染病发生或流行的制剂，总称为疫苗。 细菌 —— “菌苗” 病毒及立克次氏体 —— “疫苗” 细菌代谢产物 (毒素) —— “类毒素”;二、疫苗的发展历史 第一代疫苗：减毒、灭活疫 (菌) 苗 第二代疫苗：微生物的天然成分或其起免疫作用的亚单位疫 苗、基因工程疫苗等。 第三代疫苗：核酸 (DNA) 疫苗;三、疫苗分类 灭活疫苗 ;三、疫苗分类 减毒活疫苗 (live-attenuated vaccine) 将病原微生物 (细菌或病毒) 在人工训育的条件下，使其产生定向变异，极大程度地丧失致病性，但仍剩余一定的毒力、免疫原性和繁衍能力。如卡介苗、牛痘、麻疹等疫苗。 优点：一次免疫即可获得长久免疫力，类似自然状态下的轻型或隐性感染，可诱导体液免疫和细胞免疫。 缺点：不易保存，存在回复突变的危险;三、疫苗分类 多糖疫苗 由长链糖分子构成，如细菌的荚膜多糖。 组分疫苗 (亚单位疫苗，subunit vaccine) 从细菌或病毒培养物中，以生物化学和物理方法提取纯化有效特异性抗原成分制成的疫苗。如流感疫苗。 优点：免疫效果好，不良反应少; 用基因工程方法或分子克隆技术，分离出病原微生物的保护性抗原基因，并将其转入原核或真核系统、表达出该病原的保护性抗原，制成疫苗；或者将病原微生物的毒力相关基因删除掉，使成为不带毒力相关基因的基因缺失苗;三、疫苗分类 合成肽疫苗 (synthetic peptide vaccine) 将具有保护性免疫力的人工合成肽与适当载体结合后，再加入佐剂制成的疫苗，如乙肝病毒多肽疫苗。 抗独特型抗体疫苗 抗独特型抗体 (?Id) 是针对抗体分子V区上的特异性抗原表位 (独特型) 的抗抗体。?Id与原始抗原分子的决定簇互为“内影像”关系，可模拟抗原的结构和功能，成为一种新型???苗。;三、疫苗分类 基因疫苗 (DNA vaccine) 常被称作“裸DNA”疫苗，将编码病原体有效免疫原的基因序列克隆到合适的质粒DNA载体上，制备成核酸表达载体，通过肌肉注射等方法将其导入体内，由宿主细胞的转录系统合成保护性抗原，从而诱导机体产生特异性免疫应答。 基因免疫过程中所使用的核酸表达载体称为基因疫苗，又称核酸疫苗。;四、基因疫苗的优势 可诱导相应的免疫应答：DNA在自身细胞中可表达目的抗原，其递呈过程与自然感染十分相似 安全：相对减毒活疫苗所存在的潜在感染风险，DNA疫苗安全无副作用 稳定：DNA的理化性质比较稳定，体外不易降解，便于储存和运输 制备简便、价格低廉：培养细菌可大量提取质粒，生产成本远远低于其他类型疫苗 免疫递送简便、易操作：DNA质粒可直接进行皮下免疫，也可与佐剂联合应用或通过脂质体或纳米分子包装成颗粒进行递送 多功能疫苗的联合免疫：在同一疫苗载体中，可同时插入若干个编码目的抗原的基因，实现一种疫苗预防多种疾病的目标。; DNA疫苗——疫苗研究史上的第三次技术革命 1994年5月，WHO，日内瓦，DNA疫苗会议 美国FDA已批准流感、结核、疟疾、乙肝等数种的DNA疫苗进入临床试验阶段，其中结核和疟疾DNA疫苗获准生产。 目前，国内外已有二十余种分别针对细菌性传染病、病毒感染性疾病、寄生虫、肿瘤、自身免疫性疾病、变态反应性疾病等的DNA 疫苗正在进行临床前试验研究。;目前已进入临床前试验的DNA疫苗;五、基因疫苗的缺陷;六、克服基因疫苗缺陷的策略 RNA疫苗载体的优劣 优势：细胞质内表达，降低了与宿主细胞基因组整合的概率。 劣势：半衰期短，稳定性较差；体内转染效率低，外源基因表达水平不高。 RNA复制子疫苗载体 优势：利用自身RNA复制酶，实现外源基因的高效表达。 劣势：稳定性差 复制型DNA疫苗载体 将具有“自主复制”功能的RNA病毒复制元件构建于DNA疫苗载体，可克服常规DNA疫苗、RNA疫苗以及RNA复制子疫苗的缺点。;七、提高基因疫苗免疫效率的策略;引入合适的抗凋亡蛋白：在DNA疫苗中引入编码抗凋亡蛋白的基因如Bcl-XL，以延长APC的寿命 利用热休克蛋白 (HSP)：在天然免疫中可作为一种“危险信号和活化剂”，以及它在MHCI类抗原加工途径中作为分子伴侣的特点，在DNA疫苗中引入HSP (如HSP-70) 的