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第十章 蛋白质的研究方法与原理
第一节 概 述
直接从生物组织中提纯蛋白——蛋白质的分离纯化包括以下过程:1.破碎生物组织,并用适当的缓冲液将蛋白质抽提出来;2.将有关的蛋白质分级沉淀下来; (盐析法或有机溶剂法)3.应用层析法或电泳法使它们各自分开;4.蛋白质结晶;5.蛋白质纯度鉴定和含量测定。
制备过程中注意事项:要求自始至终保持在天然状态1. 避免一切过激因素--如过酸或过碱,高温,重金属等的影响。2. 通常都在低温条件下操作。3. 尽可能使样品中蛋白质的浓度维持在较高水平。
第二节 蛋白质的分离与纯化技术
一、蛋白质沉淀与结晶
(一)盐析法概念:将中性盐加入蛋白质溶液,破坏水化膜和电荷
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