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实验十二小麦抗病性的鉴定Ⅰ小麦抗条锈病的鉴定
一、目的学习和初步掌握小麦条锈病抗性鉴定技术。 二、内容说明 锈病对小麦产量的影响很大,在*些地区甚至是限制小麦增产的主要因素。其中条锈病(Puccinia striiformis)是小麦三种锈病中分布面最广、危害最大的病害。选育和栽培抗锈品种是防治小麦锈病危害的一项最根本、最有效的措施。因此,从事小麦育种工作必须掌握对锈病抗性的鉴定方法。 锈病在自然条件下,并非每年各地都严重发生。因此,在进展抗锈病育种时,除在发病的麦田中进展直接鉴定外,还必须人工接种鉴定,如采用幼苗鉴定和成株鉴定。幼苗鉴定一般在温室中进展,于麦苗第一叶长达4—5cm时接种病原菌,等充分发病后进展鉴定。其优点可在较短的时间内测定大量材料的抗性,测定对不同生理小种的抗性,还能防止本地没有而外地有的新生理小种的传播。由于小麦受锈病危害主要是成株期,因此田间进展成株鉴定更能反响大田生产上的抗性。本实验采用成株期人工接种鉴定法。 三、材料仪器??? 1.材料供试小麦育种材料、感病对照品种、抗病对照品种;供试条锈病菌种(选用致病力强、分布广的不同生理小种)。??? 2.仪器用具试管、培养皿或烧杯、玻棒、注射器等。 四、方法步骤??? 1.供试材料的种植把每个被鉴定材料种成一个小区,北方春季经常干旱,采用凹穴播种法,播种时灌水,提高保湿性,以利充分发病。在鉴定材料圃的四周和在鉴定区内每隔10—20个小区播种高感品种作为诱发行。诱发行最好用2—4个高感品种等量混合播种。??? 2.接种时间接种条锈病的适宜时间,通常是在小麦拔节前后。??? 3.采集孢子和配制孢子悬浮液??? (1)采集条锈菌孢子在温室培养的发病植株上,按不同生理小种分别采集新鲜孢子粉,将试管倾斜套进麦株病叶;再轻轻震动,使已成熟的孢子落于管内,到达要求量即可。??? (2)孢子悬浮液的配制把采集来的新鲜孢子粉,在玻璃杯(或培养皿)内先用少量蒸馏水湿润孢子粉,搅成糊状,再加水稀释,至孢子悬浮液透光呈桔黄色即可。配制孢子悬浮液时,最好是分生理小种配,以便分别接种,减少小种间相互干扰。如果采取混合接种,则各小种的孢子粉事先应等量混合,而后配成孢子悬浮液,现配现用。??? 4.接种方法一般可用的接种方法有涂抹、注射、喷雾、喷粉等方法,但最常用的是注射接种法。其方法是:?? (1)将配制好的孢子悬浮液吸入注射器,装上针头,而后在感病诱发行植株的第二可见(从上数)叶片与叶鞘相接处将针头倾斜刺入,切勿刺穿,再稍稍回抽,即行注射孢子液,以见到心叶上端冒出水珠为度。在诱发行接种,一般每隔1m左右选取单茎3—5个予以注3—5针。?? (2)锈菌孢子一般多浮于液面,在注射时,必须注意震动。如气候干旱,接种前几天最好先行灌水,以提高田间湿度,有利于锈病孢子萌发、侵染和发病。?? (3)接种应选择晴天、无风或微风,估计夜间有露的那天黄昏进展。为了提高田间湿度,接种后和开场发病后,在诱发行上用清水喷雾,或浇水,保证良好的诱发条件。??? 5.鉴定工程及抗性分极标准衡量小麦品种对锈病的抗性和发病程度,常用以下三个指标,即反响型、普遍率及严重度。??? (1)反响型是指小麦植株受病菌侵染后的保卫性反响。可以用过敏性坏死的有无及强弱,夏孢子堆能否形成、生长量的大小、多少来判断。优点是能较好地反映出品种免疫性的本质。目测评定,其反响型可分为6级,其分级标准如表12-1。
??? (2)普遍率指病害发生的普遍程度,即发病叶片数占调查总叶片数的百分率。一般用目测估计法观测记载。要求准确鉴定时,可根据被鉴定材料小区面积的大小,可设点随机选取30—50片叶观察记载,并按下式计算:
??? (3)严重度即病叶上孢子堆占叶面积的百分率,用以表示病害发生的严重程度。理论上讲,应将小区内每一片叶都进展统计而后取其平均值。但实际工作中,往往因人力缺乏,而仅采用目测估计法,将发病叶片总观后得出结论。严重度计算公式如下: 严重度分级标准目前还不统一,但多数采用7级分级标准(表12-2)??? 6.病情鉴定在正常情况下,接种后约经两星期即可发病,抗锈性的病情鉴定时间是小麦乳熟期以后,田间锈病开展到顶峰时进展。每个品种逐个进展鉴定记载。鉴定小麦品种的抗锈性应以鉴定反响型为主,并目测鉴定普遍率和严重率。鉴定杂种后代只鉴定反响型。均按上述分级标准进展评定。 五、实验作业??? 1.采集条锈病菌新鲜孢子和配制其孢子悬浮液,并按分配任务进展注射接种和做好接种后的田间管理工作。??? 2.发病盛期对供鉴材料的抗病性进展鉴定,并对抗性进展综合评价分析。??? 3.小麦条锈病发病条件是哪些在人工接种时怎样保证这些条
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