第原核基因表达调控演示文稿.pptVIP

* 分子生物学 原核基因表达调控 2. mRNA前导区序列分析 trp前导区的碱基序列已经全部测定，发现：完整的前导序列可分为1、2、3、4区域， 当前第95页\共有173页\编于星期三\11点 * 分子生物学 原核基因表达调控 四个区域片段能以两种不同方式配对，有时以1-2和3-4配对，有时只以2-3方式配对 当前第96页\共有173页\编于星期三\11点 * 分子生物学 原核基因表达调控 核糖体经过前导区继续翻译的能力控制着这两种结构的转换，决定mRNA是否形成终止结构 前导序列的终止区与一般的转录终止位点特点相同，具有潜在的二重对称结构能形成茎环，幷具有成串的 U。 当前第97页\共有173页\编于星期三\11点 * 分子生物学 原核基因表达调控 3 转录的弱化效应 转录弱化理论认为，mRNA转录的终止是通过前导肽基因的翻译进行调节的. 在前导肽基因中有两个相邻的色氨酸密码子，在翻译时对 tRNATrp 的浓度十分敏感。 当前第98页\共有173页\编于星期三\11点 * 分子生物学 原核基因表达调控 当培养基中Trp浓度很低时，负载有Trp的tRNA-Trp很少，翻译通过两个相邻色氨酸密码子的速度很慢，当4区被转录完成时，核糖体才进行到1区（或停留在两个相邻的色氨酸密码子处）这时的前导区结构是2-3配对，不形成3-4配对的终止结构，所以转录可继续进行，直到将色氨酸操纵子中的结构基因全部转录完为止。 当前第99页\共有173页\编于星期三\11点 * 分子生物学 原核基因表达调控 当培养基中Trp浓度很低时，负载有Trp的tRNA-Trp很少，翻译通过两个相邻色氨酸密码子的速度很慢，当4区被转录完成时，核糖体才进行到1区（或停留在两个相邻的色氨酸密码子处） 当前第100页\共有173页\编于星期三\11点 * 分子生物学 原核基因表达调控 这时前导区结构是2-3配对，不形成3-4配对的终止结构。 所以,转录可继续进行，直到将色氨酸操纵子中的结构基因全部转录完为止。 当前第101页\共有173页\编于星期三\11点 * 分子生物学 原核基因表达调控 测定结果发现，在缺乏Trp时,所有的RNA聚合酶都能经过弱化子继续参与转录。 加上取消阻遏增加的约70倍的表达，总表达量可增加约700倍。 Trp操纵子的衰减子区序列 色氨酸浓度高引起聚合酶提前终止转录的另一个原因是在衰减子中有能形成转录终止信号的序列及随后连续排列的8个A-T碱基对。事实上，在第3和4区存在反向重复序列，能通过分子内碱基配对形成发夹的终止结构（图）转录物发夹结构之后的一串U能够降低转录物与DNA结合。 当前第102页\共有173页\编于星期三\11点 * 分子生物学 原核基因表达调控 归纳：Attenuator (衰减子)：提前终止转录，调节基因表达的功能区域，是在转录起始点前导序列：162nt 当前第103页\共有173页\编于星期三\11点 * 分子生物学 原核基因表达调控 当培养基中色氨酸浓度高时，核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子，在4区被转录之前，核糖体就到达2区，这样使2-3不能配对，3-4区可以自由配对形成茎-环式的终止子结构，使得只有约10％的RNA聚合酶能继续参与色氨酸操纵子结构基因的转录。 当前第104页\共有173页\编于星期三\11点 * 分子生物学 原核基因表达调控 由此可见，弱化子对RNA聚合酶转录的终止依赖于前导肽翻译中核糖体所处的位置，而细胞中色氨酸存在与否，决定了mRNA 转录的弱化子结构，使弱化子中1、2、3、4区域呈现竞争性配对，从而产生了弱化效应，这是色氨酸操纵子第二水平调控机制。 当前第105页\共有173页\编于星期三\11点 * 分子生物学 原核基因表达调控 色氨酸含量变化对阻遏过程和弱化过程的作用方向是相同的。 前者主要控制操纵子基因表达的启动，而后者主要决定转录和翻译是否能继续进行下去。 弱化子对基因表达活性的影响普遍存在于大肠杆菌氨基酸生物合成的操纵子中。 当前第106页\共有173页\编于星期三\11点 * 分子生物学 原核基因表达调控 例如，色氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、异亮氨酸和缬氨酸操纵子，以及沙门氏菌的组氨酸和亮氨酸的操纵子、嘧啶合成操纵子等等，都采取弱化子调节这种方式。 每个操纵子的前导肽中都含有该操纵子所要调控的重复密码子，如在Trp前导肽第10和第11位上有相邻的两个Trp密码子。 当前第107页\共有173页\编于星期三\11点 * 分子生物学 原核基因表达调控 His操纵子中也具有一个类似的能编码前导肽的碱基序列，含有7个相邻的His密码子。 Phe操纵子中同样存在弱化子结构，其前导序列中也有7个Phe密码子. 当前第108页\共有1