冷破碎苹果皮渣中多糖提取工艺优化及除杂方法研究.docxVIP

? ? 冷破碎苹果皮渣中多糖提取工艺优化及除杂方法研究 ? ? 李锦运，郭玉蓉，董守利，段亮亮，仇农学，牛鹏飞 (陕西师范大学食品工程与营养科学学院，陕西西安710062) 冷破碎苹果皮渣中多糖提取工艺优化及除杂方法研究 李锦运，郭玉蓉*，董守利，段亮亮，仇农学，牛鹏飞 (陕西师范大学食品工程与营养科学学院，陕西西安710062) 采用二次回归旋转组合设计方法从冷破碎苹果皮渣中提取多糖，研究了提取温度、提取时间、料液比、提取次数对多糖提取效果的影响，确定了冷破碎苹果皮渣多糖的最佳提取范围。实验结果表明，影响冷破碎苹果皮渣多糖提取率三因素的主次顺序为:提取温度＞提取时间＞料液比。优化后的回归方程为:Y=7.5966+0.5336X1+0.4946X2+ 0.2298X3+0.3611+0.1914。冷破碎苹果皮渣多糖最优提取工艺为:提取时间为5.7h、提取温度为95.2℃以及料液比为1∶93，在此条件下可得最大提取率11.28%。采用HCl法可将多糖中蛋白质脱除80.2%，多糖损失率为9.7%;透析法对多糖脱色效果最好，透析后透光率可达到65.9%，提高了23.5%，多糖损失率仅为31.7%。 苹果多糖，提取，二次回归旋转组合设计，脱蛋白，脱色 1 材料与方法 1.1 材料与仪器 冷破碎苹果皮渣 自行研发设计冷破碎设备，由陕西鼎合机械有限责任公司制造，于2009年12月试机，苹果渣经50℃烘干，粉碎过60目筛;透析袋25mmMWCO8000 上海绿鸟科技有限公司;95%乙醇、无水乙醇、石油醚、苯酚、硫酸、HCl、NaOH、考马斯亮蓝G250、木瓜蛋白酶(1000U/mg，反应适宜条件:pH5～6，温度55℃)、三氯乙酸、氯仿 均为分析纯;各种树脂，活性炭。 粉碎机，分样筛，恒温水浴锅，TGL-4G离心机，磁力搅拌器，SHZ-D循环水式真空泵，RE-52A旋转蒸发仪，冷冻干燥机，索氏提取仪，722光栅分光光度计，电子天平，恒温水浴振荡器等。 1.2 实验方法 1.2.1 提取工艺流程［5-7］冷破碎苹果皮渣→粉碎→过60目筛→脱脂→热水浸提→浸提液离心→上清液50℃减压浓缩→4倍体积95%乙醇醇沉→离心→沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤→真空冷冻干燥→粗多糖制品 1.2.2 多糖含量计算 多糖提取率(%)=粗多糖质量/苹果皮渣质量×100% 1.2.3 单因素实验设计［8-9］分别单独考察提取时间(1、2、3、4、5、6h)、提取温度(25、40、55、70、85、100℃)、料液比(1∶20、1∶40、1∶60、1∶80、1∶100、1∶120g/mL)、提取次数(1、2、3次)对苹果多糖提取率的影响。 1.2.4 二次回归旋转正交组合实验设计［8-9］零水平值、最佳因素根据单因素实验结果确定。 1.2.5 粗多糖脱蛋白方法比较 取用1.2.4确定的优化工艺提取的粗多糖1.000g，定容至500mL，用以下几种方法对粗多糖进行脱蛋白:TCA-正丁醇法、TCA法、Sevage-TCA法、Sevage法［10］、HCl法［11］、木瓜蛋白酶法、木瓜蛋白酶-TCA法、木瓜蛋白酶-Sevage法［12］。蛋白质测定采用考马斯亮蓝G250法［13］，多糖含量测定采用苯酚-硫酸法［14］。 1.2.6 粗多糖脱色树脂种类的筛选 称取经脱蛋白的多糖1.000g，定容至500mL，选择较常用的大孔吸附树脂LS-300B、LS-810、LS-806B(由蓝深树脂有限公司提供)、D113-2、DA-201C、732、D101、AB-8［15-16］8种树脂对多糖进行脱色，脱色条件为:温度55℃，时间4h，振荡转速150r/min，在380nm处测定透光率。 建筑工程设计管理中BIM应用水平的提升，需要加大相关应用研究工作力度，对BIM在建筑工程设计管理中的应用给予更多支持，提升建筑领域发展中BIM在工程设计管理方面的应用水平。 1.2.7 数据处理 采用DPS、EXCEL、SPSS软件对实验结果进行处理。 2 结果与分析 2.1 单因素实验结果 2.1.1 提取时间对冷破碎苹果皮渣多糖提取率的影响 由图1可知，冷破碎苹果皮渣中多糖提取率随着提取时间的延长而提高，但是增长缓慢，提取5h所得的多糖最多。提取6h后多糖提取率反而下降，可能是多糖在长时间高温下部分发生水解。综上所述，提取时间为4h时，多糖提取的得率与成本在较佳水平。 图1 不同提取时间对冷破碎苹果皮渣多糖得率的影响 2.1.2 提取温度对冷破碎苹果皮渣多糖提取率的影响 由图2可知，冷破碎苹果皮渣的多糖提取率随着温度的升高而提高，在提取温度为100℃时最高(在恒温水浴锅中提取，设置温度100℃，水沸腾时温度经测定实际为98～99℃)。因为水在沸腾时蒸发较快，能耗较高，因此实验最佳温度