羊肚菌原种配方筛选实验方案讲解学习.pdfVIP

精品文档 羊肚菌原种配方筛选试验方案 一、羊肚菌的生物学特性 1、生态环境 羊肚菌发生地生态环境复杂多样，而且不同种类也有生态上的变化，羊肚菌 与植被类型也极为复杂。多生长于阔叶林地上及路旁，单生或群生。还有部分生 长在杨树林、果园、草地、河滩、榆树林、槐树林及上述林边的路旁河边。 2、土壤 羊肚菌是一种土生菌，菌丝分布在土壤中。大多羊肚菌发生在腐殖土、黑（黄） 色壤土、沙泥混合土中。 3、发生时间 羊肚菌主要发生在两个季节：春末夏初和夏末秋初，这两个时段的典型特征 是前后存在温差的变化，或先低后高，或先高后低。 4 、温度 研究认为羊肚菌属低温型真菌，菌丝在 3-28℃均能生长，生长最适温度为 18-22℃，孢子萌发最适宜温度 15-20℃，子实体生长最适宜温度为 15-18℃。昼 夜温差大，能促进子实体的形成。 5、水分和湿度 羊肚菌生长基质的含水量与一般食用菌相似， 最适含水量为 60%-65%，在子 囊果生长地土壤的含水量在 20%-30%为宜，子囊果只有在空气相对湿度为75%-95% 的条件下才能正常生长。 6、光照和空气 羊肚菌菌丝和菌核生长阶段不需要光照。光线过强会抑制菌丝生长，菌丝在 暗处或微光条件下生长很快。光照对子囊果的形成有一定的促进作用，太强或过 弱不利于子囊果的生长发育。羊肚菌也是好氧真菌，足够的氧气和良好的通风场 所是保证羊肚菌正常发育下的必要条件，菌丝生长阶段对空气无明显的要求，子 囊果生长发育则对空气有较强的要求，CO2 浓度不得超过 0.3%。 7、PH 研究认为，羊肚菌生长的最适PH 在 6.5-7.5 之间，趋于中性。 精品文档 精品文档 二、供试菌株 选取 3 种羊肚菌菌种作为供试菌株 三、母种的制作 1、母种培养基的制作 配方：马铃薯综合培养基 （1L） 马铃薯 200g+葡萄糖 20g+琼脂 20g+磷酸二氢钾 3g+硫酸镁 1.5g Note：马铃薯需挖去芽眼、削皮、切块加水煮 30min 左右用四层纱布过滤取 滤液，称取其他原料一同置于锅中加热煮沸定容至一定的体积，分装 到试管或锥形瓶中置于高压灭菌锅过灭菌 1h 左右，灭完菌后待高压 锅压力降至 0 ，取出培养基摆斜面或分装到无菌的培养皿中冷却接种。 2、母种的接种及培养 在超菌工作台上按照要求进行接种，接种后置于 20℃的培养箱中避光培养 三天即可长满培养皿表面，4-6 天就可长出菌核。 四、原种的制作 1、配方选择 配方 1 棉籽壳 75%、木屑 8%、麦麸 12%、石灰 1%、腐殖土 4% 配方 2 木屑 75%、麸皮 20%、磷肥 1%、石膏 1%和腐殖土 3% 配方 3 麦粒 60%、谷壳 20%、石膏 1%、腐殖土 19% 配方 4 麦粒 75%、土壤 23%、石灰 1%、过磷酸钙 1% 配方 5 棉籽壳 30%、腐殖土 30%、木屑 40%、磷酸二氢钾 0.2% 配方 6 全麦粒 100% 2、培养基制备 将配方 1 至配方 8 的基料按比例称好， 加入适量的水， 使含水量达 60% 左右；用手握时， 指缝间有水溢出，但不滴下； 然后装入 25 mm ×250 mm 的 试管， 使装入量及松紧度一致。每个处理装 10 支试管， 高温、 高压灭菌， 置 于暗处冷却备用。 3、注意事项 精品文档 精品文档 麦粒需用水浸泡 24h 后沥干水分 装试管要均匀、松紧度一致，多余的用塑料折角袋或玻璃瓶装。 高压灭菌 2h 左右 接种量、接种方式等均需相同。 3、培养条件 置于 18℃左右的恒温培养箱中暗培养 五、菌丝长势的观察记录 六、时间安排 时间 任务 五、材料准备 1、培养料： 名称