河北农业大学免疫学课件第二十二章免疫学检测原理及临床应用详解.pptVIP

当前第30页\共有44页\编于星期三\6点 免疫胶体金检测技术用于怀孕诊断 （怀孕） （未怀孕） 当前第31页\共有44页\编于星期三\6点 河北农业大学免疫学课件第二十二章免疫学检测原理及临床应用详解演示文稿 当前第1页\共有44页\编于星期三\6点 优选河北农业大学免疫学课件第二十二章免疫学检测原理及临床应用 当前第2页\共有44页\编于星期三\6点 目 录 基于抗原-抗体反应的检测方法 免疫细胞检测 免疫分子检测 免疫学诊断与监测 当前第3页\共有44页\编于星期三\6点 第一节 基于抗原-抗体反应的检测方法 抗原与抗体在体内体外均能发生特异性结合反应，因抗体主要来自血清，因此在体外进行的抗原抗体反应又称为血清学反应或免疫血清学技术。 当前第4页\共有44页\编于星期三\6点 一、抗原-抗体反应的特点 1.特异性与交叉性 交叉反应是区分血清型和亚型的重要依据！！ 当前第5页\共有44页\编于星期三\6点 2.抗原-抗体结合的带现象与可见性 当前第6页\共有44页\编于星期三\6点 3. 可逆性 当前第7页\共有44页\编于星期三\6点 4. 反应阶段性 第一阶段：特异性结合阶段 特点：反应快（数秒至数分钟）、无可见反应 第二阶段：反应的可见阶段 特点：反应慢（数分钟至数小时）、表现为凝集、沉淀、补体结合等反应，所受影响因素较多。 当前第8页\共有44页\编于星期三\6点 二、影响抗原抗体结合的因素 电解质：生理盐水、缓冲液 温度：37 或 4 摄氏度 酸碱度：pH值在 6~8 抗原和抗体的性质（抗体特异性和亲和力） 振荡：适当 杂物和异物 当前第9页\共有44页\编于星期三\6点 三、抗原-抗体反应检测方法 反应类型及试验名称 反应类型及试验名称 凝集试验 直接凝集试验 标记抗体技术 免疫荧光抗体技术 间接凝集试验 免疫酶标记技术 乳胶凝集试验 放射免疫测定技术 沉淀试验 絮状沉淀试验 化学发光标记技术 琼脂免疫扩散试验 免疫复合物散射反应 免疫电泳 血清学新技术 免疫传感技术 火箭免疫电泳 免疫印记技术 补体参与的试验 补体结合试验、补体依赖性细胞毒试验、免疫黏附血凝试验 免疫胶体金技术 免疫沉淀技术 免疫核酸 探 针技术 中和试验 病毒 中 和试验 免疫电 镜 技术 毒素 中 和试验 免疫蛋白芯片技术 当前第10页\共有44页\编于星期三\6点 1. 凝集反应 直接凝集 当前第11页\共有44页\编于星期三\6点 间接凝集 当前第12页\共有44页\编于星期三\6点 间接凝集抑制试验 当前第13页\共有44页\编于星期三\6点 协同凝集试验 人血清IgG可与葡萄球菌A蛋白（SPA）结合，将已知特异性抗体IgG结合至SPA, IgG Fab暴露在金黄色葡萄球菌菌体表面，其与相应抗原特异性结合，导致金黄色葡萄球菌凝集。 当前第14页\共有44页\编于星期三\6点 2. 沉淀反应 单向免疫扩散 双向免疫扩散 当前第15页\共有44页\编于星期三\6点 双向双扩散沉淀线与抗原成分的关系 当前第16页\共有44页\编于星期三\6点 免疫电泳 当前第17页\共有44页\编于星期三\6点 3. 补体参与的反应 溶血空斑试验 当前第18页\共有44页\编于星期三\6点 4. 免疫标记技术 （1）免疫荧光法 当前第19页\共有44页\编于星期三\6点 唾液腺中的狂犬病毒 单纯疱疹病毒 当前第20页\共有44页\编于星期三\6点 （2）酶免疫测定 用酶标记的抗体进行抗原抗体反应。 一般用酶标仪测定光密度值（OD值）以反应抗原或抗体含量。 灵敏度可达 ng ~ pg/ml 水平。 常用标记的酶为辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）等。 当前第21页\共有44页\编于星期三\6点 酶联免疫吸附试验（enzyme linked-immunosorbent assay, ELISA）: 将已知抗原或抗体吸附在固相载体表面，在固相表面经行抗原抗体反应，通过洗涤固相表面抗原抗体复合物与液相中游离成分分离。 当前第22页\共有44页\编于星期三\6点 酶标仪 当前第23页\共有44页\编于星期三\6点 当前第24页\共有44页\编于星期三\6点 当前第25页\共有44页\编于星期三\6点 酶联免疫斑点试验（enzyme linked immunospot assay, ELISPOT） 当前第26页\共有44页\编于星期三\6点 BAS-ELISA（生物素-亲和素系统ELISA） 当前第27页\共有44页\编于星期三\6点 免疫组化技术 当前第28页\共有44页\编于星期三\6点 免疫胶体金技术 当前第29页\共有44页\编于星期三\6点