YY_T 1453-2016组织工程医疗器械产品 I型胶原蛋白表征方法.pdf

YY中华人民共和国医药行业标准YY/T1453—2016组织工程医疗器械产品I型胶原蛋白表征方法Tissue engineering medical device products-Methods for determination of type I collagcn2016-07-29发布2017-06-01实施国家食品药品监督管理总局发布 GB/T 1453—2016目次前言1范围规范性引用文件3术语和定义4I型胶原蛋白性能测试方法附录A（规范性附录）工型胶原蛋白纯度测定附录B（规范性附录）羟脯氨酸含量测定附录C（规范性附录）熔点测定附录D（规范性附录）微量元素分析10附录E(规范性附录)总糖含量测定11 GB/T 1453—2016B.8.2.1L确氮酸对照品：国家对照品。B.8.2.2盐酸溶液，c(HCD)=6mol/L，将优级纯盐与水等体积混合。B.8.2.3洗脱用柠檬酸销缓冲液：按仪器使用说明书配制，B.8.2.4单三溶浪：按仪器使用说明书配制，B.9L-羟脯氨酸对照品溶液制备B.9.1L-羟脯氨酸对照品储备液，取L-整脯氧晚对照品适量于100mL容量瓶中，精密称定，加水溶解并释至刻度B.9.2L-羟脯氨酸对照品落，精量取L-羟脯氨酸对照品储备夜，加水稀释至刻度，B.10供试液制备取干爆恒重后的样品置于水解臀中，精密称定，加人6mol/LHCI适量，充氮封臀，105C水解22h~24h。冷却，置旋转蒸发仪瓶中，60C减压蒸发至干。用水洗涤蒸发瓶，转移洗漆液至容量瓶中，加水定容至刻度，制得供试液。（供试液与对照品溶渡中L-羟朋氢酸浓度相对偏差应在士10%内），B.11测定取对照品液、供试减用0.2μm的膜过滤后，分别注人氮基酸分析仪进行测定。记录对照品露液供试疫中羟确氢酸的峰面积。B.12结果与计其样品中羟脯氢融含量按式(B.2)计算：样品中羟脯氨酸合含量（%)=CXVXAa-(B.2)式中;C α 对照品中L-羟脯氨酸的浓度，单位为微克每毫升(μug/mL);称释体积，单位为升（mL)；A_供试液中L-羟脯氨酸的峰面积：Am对照品溶液中L-脯氨酸的峰面积；m干燥恒重后样品质量，单位为克(g)。8 GB/T 1453—2016附录C（规范性附录）点测定C.1原理腔原蛋白的三螺旋结构是由三条多肽链通过氨键来维持的，氢键受热会被破坏，复键的多少直接反应在熔点上，测定胶原蛋白的熔点，可以作为胶原蛋白的结构表征。C,2仪器差示扫插量热仪（DSC)。C.3测定将样品直接放入测试铝盘中，按照仪器使用说明书，以氮气气氛下，2C/min升温速度，在温度范围为20℃～150℃进行扫描，记录样品的吸收峰值对应的温度值。 GB/T 1453—2016D(规范性附录)微量元素分析D.1原理样品经销酸消化，制成供试品溶被，用原子吸收分光光度计测定络、端、钢、快、课、铅、相的含量。用原子荧光光谱仪分析法测定碑、的含量，D.2试剂硝酸：优级纯。D.3标准溶液配制取铬、镐、钢、铁、镍、铅、钼、砷、汞标准溶液，用体积分数1%的硝酸配制成1mg/mL储备液。临用前用体积分数1%的硝酸配制成所需的浓度。D.4供试液制备取样品精密称定，至烧杯中，加10mL确酸，在电热极上加热至溶被澄清，控制温度，敢口排酸至近干，加体积分数为1%的硝酸适量，加热至近沸，效冷，将溶液转移至容量瓶中，用体积分数为1%的硝酸洗涤烧杯数次，将洗涤筛并人容量瓶中，用1%的确酸稀释至刻度。D.5测定D.5.1铺、铁、铅、铬、煤、铜、钼的测定取D.4制备的供试液，按《中华人民共和国药典》(2015年版）四部0406规定的方法进行。13.5.2神、汞的测定取D.4制备的供试渡，种按GB5009.11一2014第一篇第一法规定的方法进行。承GB5009.17-2014第一第第一法规定的方法进行。10 GB/T 1453—2016附录E(规范性附录）总糖含量测定E.1原理利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯盼生成橙黄色化合物，在波长490处进行比色测定。E.2仪器与试剂E.2.1仪器E.2.1.1天平。E.2.1.2常外分光光度计。E.2.1.3水浴。E.2.2试剂除特别注明者外，所有试剂均为分析纯、E.2.2.1D-无水葡描糖对照品。E.2.2.2苯酚。F.2.2.3统酸，E.2.2.4乙酸，E.3对照品溶液配制E,3.1D-无水葡萄糖对照品储备液：精密称取105C干燥至恒重的D-无水葡萄糖对照品10mg，置E.3.2D-无水制费糖对照品系列溶疫：精密量取D-无水葡蓄糖对照品储备液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL，分别置具塞试管中，各管分别加水至3.0mL，混勾。E.4供试品落液配制用3%的醋酸或0.01mol/L的盐酸