SN 0869-2000进出口饮料中维生素C的测定方法.pdf

N中华人民共和国出人境检验检疫行业标准SN/T 0869-- 2000进出口饮料中维生素C的测定方法Method for the determination of vitamin Cin beverages for import and export2000- 06-22 发布2000-11-01实施中华人民共和国国家出人境检验检疫局发 布 SN/T 0869—2000前言本标准按照 GB/T 1.1--1993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则第 1部分：标准编写的基本规定》编写的。本标准是对原专业标准ZB X510011987《出口饮料中维生素C的测定方法》的修订。本标准从实施之日起，同时代替ZBX51001-1987。本标准由中华人民共和国国家出入境检验检疫局提出并归口。本标准由中华人民共和国上海出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：严罗美。 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准进出口饮料中维生素C的SN/T 0869-2000测定方法代替 ZX X51 001+1987Method for the determination of vitamin Cin beverages for import and export1 范围本标准规定了进出口饮料中维生素C(抗坏血酸)含量的荧光光度测定方法。本标准适用于各类进出口饮料中维生素C(抗坏血酸)含量的测定。2 测定方法2.1方法提要样品用草酸提取，然后用2,6-二氯酚靛酚将抗坏血酸氧化为顺式抗坏血酸，再与邻苯二胺结合生成一一种荧光化合物。用荧光分光光度计测定荧光强度，与标准比较定量。2.2 试剂要求使用去离子水及无荧光试剂。2.2. 1 1%草酸溶液。2.2.250%乙酸钠溶液。2.2.33%硼酸溶液。2.2.4硼酸-乙酸钠溶液：称取3g 硼酸，溶于 100 mL 50%乙酸钠溶液中。邻苯二胺溶液:称取 20 mg 邻苯二胺溶于 100 mL水中。2. 2. 52.2.62,6-二氯酚靛酚溶液：称取50 mg 2,6-二氯酚靛酚及 50 mg碳酸氢钠溶于.50mL水中。2. 2.7 2%硫脲溶液。2.2.8抗坏血酸标准溶液:准确称取 20mg抗坏血酸溶于 1%草酸溶液中,移入100mL容量瓶内,并用1%草酸溶液稀释至刻度。混匀，置于冰箱中保存，此溶液每毫升相当于0.2mg抗坏血酸。2.2. 9 抗坏血酸标准使用液:吸取 25 mL抗坏血酸标准溶液于 50 mL 容量瓶中,以 1%草酸溶液稀释至刻度，此溶液每毫升相当于100 μg的抗坏血酸。2.2.10硫酸奎宁标准溶液：精确称取奎宁10. 0 mg,用0.05mol /L硫酸溶解后移入1 000 mL容量瓶中，并用0.05mol/L硫酸稀释至刻度，此溶液每毫升相当于10 μg奎宁。使用时用0.05mol /L硫酸配制成每毫升相当于0.1 μg奎宁的工作溶液。此溶液用来校正荧光光度计的灵敏度。2.3仪器荧光分光光度计。2.4 测定步骤2.4.1样品处理精确吸取适量样品，用1%草酸溶液稀释到50mL,使其抗坏血酸的浓度在（10～100）μg/mL的范围内,摇匀。2000-11-01实施中华人民共和国国家出入境检验检疫局2000-06-22批准11 SN/T 0869—20002. 4.2 测定吸取抗坏血酸标准使用液5.0mL，置于50mL容量瓶中。另取上述样品溶液5.0mL，移入另一50mL容量瓶中。向各容量瓶中逐滴加入2，6-二氯酚靛酚溶液至标准溶液及样品溶液恰好显微红色。再加入2～3滴2%硫脲溶液使红色退去。用水稀释至刻度，摇匀。取两支20mL试管，各加入样品溶液2.0mL，于甲管中加入硼酸-乙酸钠溶液1.0mL，摇匀，放置15min(此管为样品空白溶液）。于乙管中加入乙酸钠溶液1.0mL，摇匀（此管为样品溶液），另取两支20 mL试管，各加入抗坏血酸标准溶液2.0mL，以下操作与样品溶液相同，以甲管为标准空白溶液，乙管为标准溶液。于四个试管中各加入邻苯二胺溶液6.0mL，摇勾后于暗处放置30min，以365nm为激发波长，429nm为发射波长，用0.1μg/mL硫酸奎宁溶液校正仪器灵敏度，分别测定标准溶液和样品溶液的荧光强度。3结果计算和表述按式(1)计算试样中抗坏血酸的含量：(F - Fz) × c× VX =X 100(1)(F, - F) × VI式中:X-一样品中抗坏血酸含量，mg/100mL;F,-一样品溶液的荧光强度；F2—样品空白的液荧光强度;Fs—标准溶液的荧光强度;F,—标准空白液的荧光强度;-抗坏血酸标准溶液浓度，mg/mL；V-样品混合液的总体积，mL；V1--吸取样品的体积，mL。 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口饮料中维生素 C 的测定方法SN/T中国