SN_T 4054-2014出口保健食品中育亨宾、伐地那非、西地那非、他达那非的检测方法 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4054—2014出口保健食品中育亨宾、伐地那非、西地那非、他达那非的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of yohimbin, tadalafil, sildenafil and vardenafilin health foods for export-LC-MS/MS method2014-11-19发布2015-05-01实施中华人民共和国发布BO国家质量监督检验检疫总局 SN/T4054—2014前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国湖南出人境检验检疫局、湖南省检验检疫科学技术研究院、湖南师范大学。本标准主要起草人：张莹、王美玲、朱绍华、张帆、颜鸿飞、付善良、李拥军、陈波。1 SN/T4054—2014出口保健食品中育享宾、伐地那非、西地那非、他达那非的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了保健食品中育亨宾、伐地那非、西地那非、他达那非的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于片剂、胶囊和口服液类保健食品中育亨宾、伐地那非、西地那非、他达那非的定量测定和确证。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水人规格和试验方法3原理西地那非、他达那非用甲醇超声提取，提取液经稀释后过滤；片剂、胶囊试样中的育亨宾、伐地那非口服液经直接稀释后过滤，用液相色谱-质谱/质谱仪进行测定，外标法定量。4试剂和材料除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇：液相色谱级。4.2乙腈：液相色谱级。4.3乙酸：优级纯。4.40.1%乙酸溶液：取1mL乙酸，用水稀释并定容至1000mL。4.50.1%乙酸-甲醇混合溶液（1十1，体积比）：量取100mL0.1%乙酸溶液，加人100mL甲醇，混匀备用。4.6育亨宾（yohimbin，CAS号：146-48-5，分子式：C21H26N2O：）标准品：纯度大于等于99.0%。4.7他达那非（tadalafil，CAS号：171596-29-5，分子式：C22H1gN：O4）标准品：纯度大于等于99.0%。4.8西地那非（sildenafil，CAS号：139755-83-2，分子式：C22H3oNO4S)标准品：纯度大于等于99.0%。4.9伐地那非（vardenafil，CAS号：224785-91-5，分子式：C23H32N。O4S·HC1）标准品：纯度大于等于99.0% 。4.10标准储备液：准确称取适量的上述标准品，用甲醇分别配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备溶液，4℃下避光保存。4.11混合标准中间溶液：取上述标准贮备液适量，用甲醇配制成浓度为10μg/mL的混合标准中间溶液，4℃下避光保存。1 SN/T4054—20144.12标准工作溶液的配制：根据需要用0.1%乙酸-甲醇混合溶液（4.5）将混合标准中间溶液（4.11）稀释成1ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的混合标准工作溶液，使用前配制。5仪器5.1高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。5.2超声波清洗器。5.3捣碎机。5.4分析天平：感量为0.0001g和0.01g。6试样制备与保存6.1试样制备6.1.1固体试样片剂研细，混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内；胶囊连同胶囊壳一起捣碎，混匀，均分成两份，分别装人洁净容器内。6.1.22液体试样口服液样品直接混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内。密封作为试样，标明标记。6.2试样的保存将试样于0℃～4℃下保存。在取样、制样过程中，应防止样品受到污染或发生目标物含量的变化。7测定步骤7.1提取7.1.1片剂、胶囊试样称取1g（精确至0.01g）试样于100mL具塞锥形瓶中，加人80mL甲醇超声提取30min。取出冷却至室温，将样品全部转移至100mL容量瓶中，用15mL甲醇分数次清洗锥形瓶，合并清洗液至容量瓶中并用甲醇定容至刻度，摇匀后，静置5min。移取1.0mL提取液至10mL容量瓶中，用0.1%乙酸甲醇混合溶液（4.5）定容后混匀，溶液过0.45μm微孔有机滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。7.1.2口服液准确移取1.0mL试样于10mL容量瓶中，用0.1%乙酸-甲醇混合溶液（4.5）定容至刻度，摇匀，溶液过0.45μm有机滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。7.2测定7.2.1液相色谱条件液相色