SN 1272-2003榆枯萎病毒检疫鉴定方法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1272—2003榆枯萎病菌检疫鉴定方法Inspection and identification of Ophiostoma novo-ulmi Brasierand Ophiostoma ulmi (Buism. ) Nannf.2003-05-28 发布2003-12-01 实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T言本标准的附录 C为规范性附录,附录 A和附录B为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：国家质量监督检验检疫总局动植物检疫实验所。本标准主要起草人：吴品珊、严进。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 SN/T 1272—2003榆枯萎病菌检疫鉴定方法1 范围本标准规定了进境植物检疫中榆枯萎病菌的检疫鉴定方法。本标准适用于来自榆枯萎病菌有发生国家和地区(参见附录 A)的榆属(Ulmus L,)苗木、原木和木制品中榆枯萎病菌的入境检疫。2术语和定义本标准采用下列术语和定义。2. 1异宗配合 heterothallism菌体在性的配合上有雌雄和(或)亲和力的分化,只有一定的异宗菌体(一般以十和一或 A1 和 A2加以区别)才能配合。2.2传病介体vector对侵染性病害的病原体起转移作用并创造侵入条件的生物，如昆虫、线虫等。3 原理3. 1 榆枯萎病菌的分类地位英文名 : pathogens of Dutch elm disease,pathogens of elm wilt disease学名: Ophiostoma novo-ulmi BrasierOphiostoma ulmi (Buism. ) Nannf.主要异名：Ceratocystis ulmi(Buism.）Moreau榆枯萎病菌属真菌界（Fungi)子襄菌门（Ascomycota），核菌纲（Pyrenomycetes），球壳目（Sphaeria-les），长喙壳科(Ophiostomataceae)，长喙壳属（Ophiostoma SydowSydow）。此病菌是榆属树上的有害寄生真菌，可侵染各龄榆树，引致榆树干枯、死亡，称为榆枯萎病或荷兰榆病。榆枯萎病菌由 Ceratocystis 属重新归人Ophiostoma。英国的 Brasier 在 1991 年将病菌致病力强的侵袭性亚群（aggressive subgroup），提升为新种一-Ophiostoma novo-ulmi Brasier : Ophiostoma ulmi（Buism.）Nannf.则是原来的另一个亚群一致病力弱的非侵袭性亚群（non-aggressive subgroup)。榆枯萎病菌的这两个种在菌落培养性状、生长的适宜温度、子囊壳的形态、致病性、毒素的生成和分子生物学等许多方面存在较大差异。致病力强的Ophiostoma novo-ulmi 种内又分为两个小种，欧亚小种EAN(Eurasian race)和北美小种 NAN(North American race).3.2 寄主榆枯菱病菌主要为害榆属（Ulmus L.）树木。以美洲榆（U.americana），荷兰榆（(U.hollandica），山榆(U.glabra)，英国榆(U.procera)等较为感病，人工接种可为害榉属（Zelkova S.）。3.3传播途径榆枯萎菱病菌的主要自然传播方式是随传病介体一一昆虫传播，也可通过根部接触传播。介体昆虫在濒于死亡的病树树皮内产卵，次年羽化出的成虫。这些成虫的体表和体内带有大量的病菌，取食健康的树木，使病菌传播扩散。已肯定的昆虫介体有 18 种，其中最主要的是欧洲榆小鑫（Scolytus multist-1 SN/T 1272-—2003riantus）、欧洲大榆小（Scolytus scolytus），短体边材小鑫（Scolytus pygmaeus）和美洲榆小鑫（Hy-lurgopinus rufipes)3.4鉴定原理榆枯萎病菌的两个种(Ophiostoma nouo-ulmi 和Ophiostoma ulmi)均产生异宗配合的有性子囊孢子和三种类型的无性孢子。无性孢子第一类是发簇孢属（Sporothrir)的分生孢子；第二类是长在孢梗束上的束丝无性孢子，称粘束孢属（Pesotum）；第三类是酵母状分生孢子（Blastomyces sp.）。榆枯萎病菌的形态特征，以及生物学特性和对寄主造成的症状特征是鉴定榆枯萎病菌的依据（参见附录 B）。4仪器设备和试验用具4.1仪器设备生物显微镜（具日镜测微尺），立体解剖镜，超净工作台生物培养箱，振荡器，普通天平（感量1/100），分析天平（感量1/10000），高压灭菌器，烧杯（5mL和50mL），三角瓶（250