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姜黄中提取姜黄色素 一 实验目的 1. 了解姜黄色素的抗炎、抗氧化及抗肿瘤等作用 2. 掌握姜黄色素的提取与精制方法 二 实验原理 姜黄色素是传统药食两用植物姜黄（CurcumaLonga L. ）根茎中的活性物质，姜黄色素 相对于其他天然色素，由于具有稳定性好、着色力强、色泽鲜亮等特点，已广泛作为食品的 着色剂而被人们广泛利用。 除作为食品着色剂外，姜黄色素另一特点是具有抗肿瘤活性。日本京都大学的西野教授 和美国新泽西州立大学癌症研究所 （1997）共同报道了姜黄素的抗癌活性。在癌症的促进期 把姜黄素涂布于患癌皮肤的表面，发现它具有很强的抑制皮肤癌作用。Rao 等（1995）还以 AOM 诱导的白鼠大肠癌为模型实验，确证姜黄素具有很强预防大肠癌效果，而且还明确经 口摄取姜黄素类化合物也具有很强的预防癌症效果。 姜黄素除了以上所述的生理功能之外，还具有抗炎症和抗氧化作用，抑制Leukotriene B 毒素形成作用等。姜黄素类物质的抗癌活性，从根本上来说，也是抗氧化活性的表现。因为 癌症最主要是由人体内产生大量氧自由基引发的，而姜黄素类物质作为一种多酚类物质，本 身就具有一定的戏服自由基作用，它通过消耗人体内产生的自由基，从而显出一定的抗癌作 用。研究人员还发现，姜黄素的诱导体具有非常强的抑制酪氨酸酶活性的能力。该酶在酪氨 酸合成黑色素中起着重要作用。黑色素的过剩积蓄，是形成老年色斑的主要原因。目前作为 黄色色素之一的胡萝卜素系所具有的生理活性功能已为人们所共识。而姜黄素的生理功能最 近才引起人们的关注，然而不难发现，它具有许多生理活性作用特别是抗癌活性，是非常瞩 目的。有望广泛应用于预防癌症的保健食品当中，为姜黄色素的深度开发开辟了远大的前景。 目前，利用姜黄提取姜黄色素的方法有多种，虽然在工艺流程上各有特色，但都不外乎 色素的粗提取与精制这两大步。 1. 常用的姜黄色素粗提取的方法有两种：①有机溶剂提取法：用相当于原料若干倍的 乙醇等有机溶剂浸提经粉碎的姜黄原料，然后采用离心或过滤的方式分离提取液。该法的主 要特点是提取率高，但有机溶剂消耗大，产品成本高，生产安全性差，并且提取中除姜黄色 素外还含有脂溶性杂质。②水提取法：姜黄色素易溶于碱水，可用1%左右的NaOH 浸提姜 黄中的姜黄色素，尽管效率不及有机溶剂，但从经济和安全性方面考虑，仍有很强的实用性。 2. 姜黄色素精制提纯方法：①专一性溶剂法：利用姜黄色素与其他杂质对某些溶剂（石 油醚、乙醚）溶解度的差别，经多次处理粗制品，使色素与杂质分开。②酸碱法：用酸碱对 粗制品进行适当处理使其中的脂类水解，达到易于干燥和提纯的目的。③酶水解法：用水提 取的姜黄色素，其粗制品中含有淀粉，可用淀粉酶进行处理，达到纯化目的；④柱层析法： 用有机溶剂提取的姜黄色素，含有大量脂溶性杂质，根据姜黄色素与脂溶性杂质在层析介质 上吸附性不同，用吸附柱层析的方法将其分离开。 三 仪器、材料及试剂 （一）仪器 1. 721 分光光度计 2. 旋转蒸发器 3. 抽滤装置 4. 水浴锅 5. 层析柱（60×600mm ） （二）材料及试剂 1. 三口烧瓶、三角瓶、烧杯等 2. 姜黄粉（新鲜姜黄洗净、晒干、粉碎、过50 目筛） 3. 丙酮、甲苯、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、无水乙醇、柱色谱硅胶等 四 实验步骤 （一）姜黄色素的粗提 1. 称取300g 姜黄粉，放入3000mL 的三口烧瓶中，加入900mL 丙酮，搅拌混合均匀。 2. 将三口烧瓶放入水浴锅中，加入回流冷凝装置，加热升温，在60~70℃的水浴中回流 提取4h ，冷却，过滤。 3. 过滤后的姜黄粉只用同样方法提取一次，将两次提取液合并。 4. 蒸馏回收丙酮，有黄色固体析出，过滤并自然风干，研碎即得姜黄色素粉末。 （二）姜黄色素的精制 1. 称取10g 姜黄色素及20g 硅胶，放入250mL 烧瓶中，加入 100mL 甲醇中，振荡使色 素完全溶解，水浴加热，用旋转蒸发器减压回收甲醇，的固体混合样品，研碎备用。 2. 称取400g 硅胶放入 1500mL 烧杯中，加入 600mL 氯仿，搅拌均匀，倒入 60600mm 层析柱中，湿法装柱。 3. 放出多余的氯仿，待硅胶充实后，装入待分离的固体样品。 4. 用洗脱剂（氯仿：乙酸乙酯：甲醇=38:1:1 ）进行梯度洗脱，用三角瓶接收洗脱液，每 100mL 更换一次三角瓶。 （三）产物分析 1. 用薄层色谱法