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酶免疫技术—酶免疫技术的概述(免疫学检验课件).pptx

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酶免疫技术;酶免疫技术:以酶标记的抗体或抗原作为 主要试剂,将抗原抗体反应的特异性和酶 催化底物反应的高效性和专一性相结合的一种免疫检测技术。;基本原理;;酶免疫技术的分类;一、常用的酶及底物; 1.辣根过氧化物酶(HRP) 糖蛋白(主酶)+亚铁血红素(辅基) ;邻苯二胺 OPD;OPD(邻苯二胺 )反应后显橙黄色,加酸终止反应后呈棕黄色,测定波长492nm。不稳定,有致癌性。;是一种磷酸酯水解酶,从大肠杆菌提取 ;源于大肠埃希菌 ,常用于均相酶免疫测定。 ; 在商品试剂中,经常应用的酶还有葡萄糖氧化酶(GOD) 、6-磷酸葡萄糖脱氢酶、溶菌酶、青霉素酶、脲酶、苹果酸脱氢酶等。;二、制备酶标记抗体(抗原)的方法;(一) 戊二醛交联法 ;(二) 改良过碘酸钠法 ;三、酶标记物的纯化与鉴定; 2.酶标记物的鉴定;四、固相载体 ;(二)固相载体的种类;微量反应板;酶联免疫吸附试验(ELISA)三大必备试剂:酶标志物、酶对应的底物、固相载体

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