- 1、本文档共18页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2733—-2010小反鱼兽疫检疫技术规范Quarantine protocal for peste des petits ruminants2010-11-01 发布2011-05-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数葬院
SN/T 2733—2010前言本标准按照GB/T 1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国云南出人境检验检疫局、中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、中华人民共和国西藏出人境检验检疫局。本标准主要起草人:董俊、杨建民、严树发、杨云庆、艾军、叶玲玲、徐自忠、花群义、周晓黎。
SN/T 2733—2010小反刍兽疫检疫技术规范范围1本标准规定了小反刍兽疫的病原分离及鉴定、聚合酶链式反应、血清抗体中和试验、酶联免疫吸附试验检测方法。本标准适用于小反台兽疫的诊断和流行病学调查。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T18088出入境动物检疫采样3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1 peste des petits ruminants; PPR小反刍兽疫由小反兽疫病毒引起的一种急性病毒性传染病,主要感染小反刍动物,以发热、口炎、腹泻、肺炎为特征。4 疾病简介参见附录 A。5现场检验检疫及采样5.13现场检验检疫:逐头进行临床检查,根据临床表现和特异性病理变化做出初步诊断。5.2采样:按GB/T18088规定,逐头进行采样,并按规定填写《送样单》送实验室。6 诊断方法6.1病毒分离、鉴定(生物安全三级实验室进行)6.1.1试剂和材料小反台兽疫标准阳性、阴性血清。细胞:羊肾原代细胞或非洲绿猴肾细胞(VERO)。培养液:199 或 MEM 培养基中加10%犊牛血清(经 56℃ 30 min 灭能),含青霉素200 IU/mL、链霉素 200 IU/mL。1
SN/T 2733—20维持液:199或 MEM培养基中加2%的犊牛血清(经 56℃ 30 min 灭能),含青霉素200 IU/mL、链霉素 200 IU/mL。细胞分散液:配制见附录B。犊牛血清:不含细菌、支原体,56℃灭能30 min。 PBS缓冲液:配制见附录 B。6.1.2i设备6. 1.2. 1超净工作台。6. 1.2.2乳钵或组织捣碎器。6. 1.2.3倒置显微镜。二氧化碳培养箱。可调单头微量移液器(0.5 μL~10 μL,10 μL~100 μL,100 μL~l000 μL)。冷冻微量离心机。24孔、96孔细胞培养板。6. 1.2.8 微型振荡器。6.1.3样品采集活体动物采集眼脸下结膜分泌物和鼻腔分泌物、颊部及直肠粘膜病料拭子。采集全血时加肝素抗凝剂。死亡动物,解剖尸体2头~3头,取淋巴结,特别是肠系膜和支气管淋巴结,脾和肠粘膜也应采集。采集后立即密封、冷藏送检或置含抗生素的PBS缓冲液中一20℃密封保存。编号和作好记录。眼脸下结膜分泌物和鼻腔、部及直肠粘膜病料拭子:用拭子采取分泌物,拭子一并放人盛有1.0mL含抗生素的PBS缓冲液的1.5mL离心管中。编号,冷藏送检或低温密封保存。血液:无菌、肝素抗凝采集,密封、编号后保存于4℃送检。组织脏器:无菌采集待检样品,装人一次性塑料袋或其他灭菌容器,编号,密封、冷藏送检或低温密封保存。精液:抽检的精液样品应不少于1mL,冻精样品每头每批次取样3管~5管,编号,置冰盒送检。6.1.4 样品贮运样品采集后,按批次放人密闭的采样袋内,低温、密封,送实验室。6.1.5样品处理眼脸下结膜分泌物和鼻腔分泌物、颊部及直肠粘膜病料拭子收到棉拭子样品后,500μL PBS溶解,样品振荡混合后,用高压灭菌镊子将拭子中的液体挤出,经4℃10000r/min离心10 min,取上清液作为组织培养的接种材料,编号备用。组织脏器取待检样品 2.0g于洁净、灭菌并烘干的研钵中充分研磨,加10 mL 细胞维持液混匀,4℃5 000 r/min离心15 min,取上清液转人无菌的1.5mL离心管中,编号备用。精液用维持液将精液作1:5稀释,4℃5000r/min离心10min,取上清液作为接种分离病毒的材料。2
SN/T 2733--20血液样品4 ℃ 5 000 r/min 离心10 min,用移液器吸出血浆(不要破坏白细胞层),补充 PBS至原体积,轻轻倒转试管几次:4℃ 5000 r/min离心10 min,弃上清液(保留白细胞层)。加人等量无菌的去离子水,轻轻倒转试管几次,使血细胞溶解;或用 40 μA的超声波1 min打碎红血球,4℃ 5000
您可能关注的文档
- SB_T 11221-2018客户服务专业人员技术要求.pdf
- SY_T 5827-2013解卡打捞工艺作法.pdf
- QB_T 2435-2012日用陶瓷原料筛余量测定方法.pdf
- SYT 5986-1994调剖液配注车.pdf
- SJT 10236-1991无线电力负荷控制终端装置通用技术条件.pdf
- SHT 0662-1998矿物油的紫外吸光度测定法.pdf
- WW_T 0017-2013馆藏文物登录规范.pdf
- SNT 1732.7-2006烟花爆竹用焰火药剂 第7部分:铅含量的测定.pdf
- SYT 6115-1994洗井液处理车.pdf
- SYT 6468-2000电子多点测斜仪维修与检验.pdf
- 上课《归园田居(其一)》课件28张.pptx
- 色彩的魅力课件55.ppt
- 山水田园诗导学练习鉴赏.ppt
- 部编版《白鹭》课件.pptx
- 《Excel在财务中的应用》项目七 全面预算编制方法与应用 教学课件.pptx
- 《Excel在财务中的应用》项目六 利润管理决策模型与应用 教学课件.pptx
- 《Excel在财务中的应用》项目五 运营资金的管理 教学课件.pptx
- 《Excel在财务中的应用》项目四 项目投资管理决策与应用 教学课件.pptx
- 《Excel在财务中的应用》项目三 筹资管理决策模型与应用 教学课件.pptx
- 《Excel在财务中的应用》项目二 Excel 常用函数基础 教学课件.pptx
最近下载
- 飞盘主题团建方案.pdf
- 数据挖掘导论(完整版)-习题答案.pdf
- 手术室护理实践指南-第一篇无菌技术试题及答案.docx
- Unit 1 Developing ideas High school hints 课件-2023-2024学年高中英语外研版(2019)必修第一册.pptx VIP
- 北斗卫星导航系统.pptx VIP
- 手术超声刀研究预测报告中国手术超声刀行业市场前瞻分析与未来投资战略预测报告2024-2028年.pptx
- 中国传统文化课件完整版.ppt
- 蓝色大气公安局派出所PPT模板2套.pptx VIP
- L-草铵膦原药及制剂项目 环境影响报告书.pdf
- 《中国地区竞争力对地区居民收入分配差距的影响研究》-毕业设计(论文).doc VIP
文档评论(0)