第五章目的基因的获取详解演示文稿.pptVIP

各种酶的接头可以向公司定做或购买 接上人工接头 粘性末端 CCC CCC 末端转移酶 粘性末端 ③ 同聚物加尾 当前第30页\共有73页\编于星期三\10点 当前第31页\共有73页\编于星期三\10点 4. 基因组文库的大小 一个文库要包含99%的基因组DNA时所需要的克隆数目 N= ln (1-p) ln (1-f) p: 文库包含了整个基因组DNA的概率（99%） f: 插入载体的DNA片断的平均长度占整个基因 组DNA的百分数 N:所需的重组载体数（克隆数） 基因文库的大小以及从中获得特定序列的概率的计算公式： 当前第32页\共有73页\编于星期三\10点 例如：人的基因组是 3×109 bp，插入DNA片断 的平均长度如果是1.7×104 bp N= ln (1-p) ln (1-f) = ln (1-99%) ln (1-f) = 4.61× G f N= 4.61× G f G:Genome大小；f:fragment大小 N= 4.61× G f = 4.61× 3×109 1.7×104 = 8.1×105 当前第33页\共有73页\编于星期三\10点 当前第34页\共有73页\编于星期三\10点 5. 基因组文库的扩增及保存 （1）基因组文库的扩增 ① 液体培养增殖法 最简便 混合培养方法：从琼脂糖