GB4789.4沙门氏菌检验.pptx

GB/T4789.4 食品卫生微生物学检验;修订背景 国内外方法 修订内容 前增菌 选择性增菌 分离平板 生化鉴定 血清学鉴定 报告;由于食品生产及流通的全球化、新的食品加工技 术的应用、东西方饮食习惯的交融、自然环境的改 变等因素的影响，目前沙门氏菌污染的食物种类、 季节及场所发生了重大变化。同时，随着检测技术 的发展，对于沙门菌的快速检测方法层出不穷，有 些方法已通过国际权威机构认证（如AOAC）成为 了国际标准方法。; 修订任务由卫生部全国食品卫生标准委员会 下达，由微生物标准协作组具体实施。 兄弟单位、企业、公司为参与单位。 共采集到数据800多个，专家反馈意见50余 条（采纳90%以上）条，形成标准的草案 稿、送审稿。 4 . 时间跨度2004年—2006年;;1. GB/T 4789.4 2. AOAC Official Method ：967.26， 967.27，967.28 3. ISO ：6579 4 . USFDA ： Bacteriological Analytical Manual, Chapter 5: Salmonella。;前增菌； 选择性增菌； 分离； 生化鉴定； 5.血清学鉴定； 6.报告。;国家标准 USFDA FSIS AOAC ISO;冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品;样品（20类）25g;USDA/FSIS MLG 4.02;AOAC Official Method 967.25 Salmonella in Foods Preparation of Culture Media and Reagents AOAC Official Method 967.26 Salmonella in Processed Foods Detection AOAC Official Method 967.27 Salmonella in Foods Identification AOAC Official Method 967.28 Salmonella in Foods Serological Tests;;25g样品;前增菌 选择性增菌 分离 鉴定 报告;;1 取消样品分类，前增菌液统一为“缓冲蛋白胨 水” 原国标：BPW FDA、AOAC：多种前增菌液 ISO：BPW;2 对所有样品均进行8-18h前增菌 原国标只对冻肉、乳品、蛋品等加工食品进 行前增菌，FDA、AOAC、ISO、Canada MFHPB、CCFRA等组织或国家对所有样品都 进行前增菌。;修改了样品处理方式 增加拍击式均质器，均质袋可直接培养。 增加调整pH值;1 使用“TTB、SC”，取消“MM”;使用BS、XLD、HE、科玛嘉显色培养基;I-SS;SS琼脂 上面的志 贺氏菌和沙 门氏菌;C-BS;C-HE;I-XLD;I-XLD;C-BS;C-BS;C-BS;C-HE;C-HE;I-HE;1） 采纳API 20E?或Vitek GNI?为传统;2） 生化鉴定项目进行调整;2） 生化鉴定项目进行调整（续）;;第1位数;沙门氏菌20E鉴定结果;布氏柠檬酸杆菌20E鉴定结果;河生肠杆菌20E鉴定结果;应用一系列小的多孔的聚苯乙烯卡片进行测试， 卡片含有干燥的抗菌药物和生化基质。先制备一定 浓度的欲鉴定菌株的菌悬液，然后将菌悬液接种到 各种细菌的小卡上，将其放入具有读数功能的孵箱 内，每隔一定时间，仪器会自动检测培养基的发酵 情况，并换算成能被计算机所接受的生物编码。最 后由计算机判定，打印出鉴定结果。;1 血清学鉴定中的菌体分群为选择性试验 项目;;综合以上生化试验和血清学鉴定的结 果,报告25g样品中检出或未检出沙门氏 菌。;选择性增菌液的配置 分离培养基的质控 疑似菌落的挑选 API 20E 结果判读 血清质量;VIDAS（生物梅里埃公司） BAX （杜邦公司）;VIDAS 应用酶联免疫技术制造的全自动免疫 分析仪 ，用荧光分析技术通过固相吸附 器，用已知抗体来捕捉目标生物体，然 后以带荧光的酶联抗体再次结合，经充 分冲洗，通过激发光源检测，即能自动 读出发光的阳性标本，其优点是检测灵 敏度高，速度快，可以在48小时的时间 内快速鉴定沙门氏菌、大肠杆菌O157： H7、单核李斯特菌，空肠弯曲杆菌和葡 萄球菌肠毒素等。;;DUPONT Qualicon BAX System 应用DNA分子核酸探针或基因探针技 术制造的全自动PCR分析仪。将已知核 苷酸序列DNA片段用同位素或其他方法 标记，加入已变性的被检DNA样品中， 在一定条件下即可与该样品中有同源序 列的DNA区段形成杂交双链，从而达到 鉴定样品中DNA的目的。;;马群飞;