SN 1514-2005进出口量谷中桔青霉、黄绿青霉、岛青霉检验方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1514—2005进出口粮谷中桔青霉、黄绿青霉、岛青霉检验方法Inspection of P. citrinum , P. citreo-virideand P. islandicum in foodstuff for import and export2005-02-17发布2005-07-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 1514—2005前言本标准的附录 A 是规范性附录,附录 B和附录 C是资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标推起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本标准主要起草人：王素琴、何霖、陈子红、赵宏、孙俐。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 SN/T 1514—2005进出口粮谷中桔青霉、黄绿青霉、岛青霉检验方法范围1本标准规定了进出口粮谷中桔青霉、黄绿青霉、岛青霆检验的抽样、制样和测定方法。本标准适用于进出口粮谷中桔青霉、黄绿青霉、岛青霉的检验。2抽样和制样2.1检验批以不超过2500件为一检验批。同一检验批的商品具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。2.2抽样数量抽样数量见表1。表 1批量/件最低抽样数/件11~25526~10010 10150017501～1 000201 001~2 5002.3抽样方法按2.2规定的抽样数随机抽取，逐件开启。2.4试样制备将1kg的样品平铺在白磁盘或玻璃板上其厚度不超过1cm，用棋盘式取样方法，分十点取大米200粒～500粒，放置在带盖的小称量血中。3测定方法3.1方法提要试样经乙醇溶液及氯化汞溶液处理，然后接种在察氏培养基平板上，于28℃土1℃培养一周。将可疑菌落转接到察氏培养基平板上，于28℃土1℃培养观察，对照标准菌株形态结构进行鉴定。对可疑菌落，进一步转接培养，用产毒培养来确定是否产毒。3.2试剂和材料除另有规定外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水。3.2.1无水乙醇。3.2.275%乙醇溶液：乙醇十水(3+1)。%氯化汞溶液：准确称取1g氯化汞，溶于1000ml.水中。3.2.4察氏培养基：见附录第A.1章。1 SN/T 1514—20053.2.5产毒培养液：见附录第A.2章。3.2.6产毒检定培养基：见附录第A.3章。3.2.7列希尔浮载剂：见附录第A.4章。3.2.8培养基V:见附录第A.5章。3.2.9培养基V:见附录第A.6章。3.2. 10 标准菌株:桔青霉(Penicillium citrinum AS 3.690);黄绿青霉(Penicillium citre0-viride AS3.226)；岛青霖（Penicillium islandicum AS 3. 4025）;巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium AS1.1741)。3.3仪器和设备3.3.1游标卡尺：测量范围0mm～200mm，精度0.02mm或使用抑菌圈测量仪测量。3.3.2牛津杯：高10 mm±0.1mm，内径6.8mm士0.1 mm,外径8.0 mm士0.1mm(浙江海宁医疗器械广生产或相当者）。3.3.3恒温培养箱：28℃士1℃，30℃士1℃，搁板必须保持水平。3.3.4高压灭菌器。3.3.5培养皿：内径 90 mm,底部平整光滑的玻璃血或塑料血，并应配有陶瓦盖;内径 90 mm的玻璃血。3.3.6载玻片和盖玻片。3.3.7试管（直径17mm，长170mm)。3.3.8：离心机及带刻度离心管。3.3.9其他：玻璃板、吸管、毛细管、U型玻璃棒等。3.4测定步骤3.4.1试样处理加100mL乙醇溶液，浸泡试样5min，弃去乙醇溶液；再加人氯化汞（3.2.3)溶液100mL静置1 min,弃去氯化汞溶液,最后在无菌条件下用无菌水反复清洗 3次～5次，每次 100 mL，将水倒掉空净。3.4.2平板制备于灭菌培养皿中加入20mL熔化的察氏培养基（3.2.4)，保持水平，待其凝固备用。3.4.3分离培养每个样品用10个平板，将处理空于后的大米无菌移植于察氏培养基平板上，每个平板中均勾放置10粒，置于培养箱中28℃士1℃培养，3d开始观察，直到第8d。如果可疑，可观察到15d,对照标准菌株，观察大米样品污染菌的菌落形态（参见附录B)，如无特征菌落出现，可报告阴性结果；如特征近似可疑，应做进一步镜检鉴定。3.4.4镜检鉴定转接培养将可疑菌落挑出，转接到察氏培养基（3.2.4)平板中，每个菌落转接两个平板，于28℃士1℃培养。3d开始肉眼观察菌落形态，并且直接镜检观察，直至15d。应认真记录镜检观察情况，有条件的应做菌落照相，备查。小室培养对产生小而易碎的分生孢子梗的真菌，可用小室培养法对菌丝和子实体着生状态进行观察。