NY_T 2418-2013四纹豆象检疫检测与鉴定方法.pdf

ICS 65.020B 16NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2418—2013四纹豆象检疫检测与鉴定方法Detection and identification of Callosobruchus maculatus (Fabricius)2014-01-01实施2013-09-10 发布中华人民共和国农业部发布 NY/T 2418—2013前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由农业部种植业管理司提出。本标准由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271)归口。本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、吉林省植物检疫站、吉林农业大学。本标准主要起草人：李潇楠、温克明、史树森、冯晓东、郑清、田径、陈月颖、朱莉、刘慧T NY/T 2418—2013四纹豆象检疫检测与鉴定方法1范围本标准规定了农业植物检疫中四纹豆象Callosobruchusmaculatus（Fabricius）的检疫检测与鉴定方法。本标准适用于四纹豆象的检疫检测与鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB15569--2009农业植物调运检疫规程SN/T0800.1—1999进出口粮油、饲料检验、抽样和制样方法SN/T1453-2004巴西豆象检疫鉴定方法3原理四纹豆象属鞘翅目（Coleoptera），豆象科（Bruchidae），瘤背豆象属（Callosobruchus）。主要寄主为绿豆、鹰嘴豆、豇豆、扁豆、菜豆、兵豆等。该虫以各虫态随寄主植物子实的调运进行远距离传播，成虫可通过飞翔进行近距离传播。一生经过卵、幼虫、蛹和成虫四个虫态。成虫个体变异较大，分为“标准型”和“飞翔型”。四纹豆象的形态特征、生物学特性及危害症状是其检疫鉴定的重要依据。4仪器、用具和试剂4.1仪器体视显微镜、光照培养箱、放大镜、测微尺。4.2用具标准筛、整姿台、三级台、解剖针、剪刀、镊子、浅盘、玻璃棒、载玻片、盖玻片、酒精灯、烧杯、毒瓶、还软器、昆虫针、三角纸片、玻璃瓶、标签等。4.3试剂乙醇、甘油、氢氧化钠、氢氧化钾、水合三氯乙醛、植物油或机油、甲醛、阿拉伯树脂胶、虫胶、蒸馏水等。检验中所需的其他试剂配比参见附录Λ。5现场检疫5.1抽查抽查在现场进行。抽查前应对待检豆类的货主、产地、包装、唛头、品种、数量进行核实，对于需要检疫的则开件检查包装物内外部、货物内外部及环境四周墙壁、缝隙等处有无成虫。抽查方法按照SN/T0800.1--1999的规定执行。5.2取样取样结合抽查进行，按照GB15569—2009及SN/T1453--2004的规定执行。每件中抽取的样品不少于100g，总样品量不少于2kg。对产地或途经地为疫区的产品应适当增加取样量。发现带虫豆粒作为样品带回检疫实验室检验。1 NY/T2418—20135.3检验方法5.3.1表面检验检查豆粒上是否带有虫卵，是否有成虫羽化孔和半透明的圆形小窗。5.3.2过筛检验必要时用标准筛过筛检查有无成虫。5.3.3油脂检查法取过筛检验完的样品500g～1000g，分成每50g--组，放在浅盘内铺成一薄层，按1g豆粒用植物油或机油1ml～1.5mL的比例，将油倒人豆粒内浸润30min后检查。被油浸的豆粒变成琥珀色，虫孔口种皮皇现透明斑，将有上述症状的豆粒挑出，镜下剖检。6实验室检测6.1标本处理6.1.1成虫截获的可疑活成虫，先放人毒瓶内杀死，若已经死亡，则需回软后再制作标本。将成虫头朝前背朝上放在整姿台上，用昆虫针穿刺右鞘翅的左上角，使针正好穿过右中足和后足之间。由于成虫个体较小，为防止插针时损坏标本，可以使用三角纸片粘虫法，昆虫针插在三角纸片的基部，将少许虫胶滴在三角纸片的端部，将标本粘在虫胶上。用三级台标定昆虫标本的高度，整姿干燥后加标签，记录标本的采集时间、地点、寄主和采集人等信息。6.1.2卵、幼虫、蛹卵、幼虫和蛹的可疑标本放在乙醇甘油保存液中备用，老熟幼虫应先在开水中煮1min～2min再放人乙醇-甘油液中保存。标本加注标签，并记录采集时间、地点、寄主和采集人等信息。如条件允许可做实验室饲养观察。将豆粒样品和可能带虫的豆粒装在玻璃瓶中，放置于光照培养箱中，温度20℃～30℃，相对湿度50%70%饲养，待成虫出现后再进行标本处理及鉴定。6.2制片将雄成虫腹部置于适量10%氢氧化钾或10%氢氧化钠溶液中，在酒精灯上加热煮沸3min～5min后取出，或在上述溶液中浸泡24h后取出，置于体视显微镜下解剖观察外生殖器构造，必要时可将生殖器标本用霍氏液封片留存。6.3镜检将卵、幼虫和成虫置于体视显微镜下观察外部并测量相关数据。7鉴定7.1成虫成虫符合四纹豆象成虫典型形态