SNT 2102.4-2008食源性病原体PCR检测技术规范 第4部分：定性检测方法扩增和检测要求.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2102.4—2008/ISO 20838 :2006食源性病原体PCR检测技术规范第4部分：定性检测方法扩增和检测要求Polymerase chain reaction(PCR) for the detection of food-borne pathogens-Part 4 : Requirements for amplification and detection for qualitative methods[ISO 20838:2006, Microbiology of food and animal feeding stuffs-Polymerase chain reaction(PCR) for the detection of food-borne pathogens-Requirements for amplification and detection for qualitative methods , MODJ2009-02-01实施2008-07-17 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 2102. 4—2008/ISO 20838 :2006前言SN/T2102《食源性病原体PCR检测技术规范》共分为四个部分：-第1部分：通用要求和定义；第2部分：PCR仪性能试验要求；-第3部分：定性检测方法样品制备要求；一第4部分：定性检测方法扩增和检测要求。本部分为SN/T2102的第4部分。本部分修改采用ISO20838：2006《食品与动物饲料微生物学食源性病原体 PCR 检测定性检测方法扩增和检测要求》，并做了如下修改：对“前言”和“引言”进行了修改；对“规范性引用文件”的描述按照GB/T 1.1的要求进行了修改；在“术语和定义”部分加人了实时荧光PCR、实时荧光RT-PCR和RT值等三个定义；在“试剂”部分加人了“探针”和“荧光染料”；在7.5加入了对探针设计的要求；-将标准中的国际标准用相应的国家标准或行业标准替代，如GB/T27025替代ISO17025;将“警告”改为“安全要求，并放置到标准的末尾段”；删除了标准后的参考文献。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分由中华人民共和国广西出入境检验检疫局、中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、中华人民共和国山西出人境检验检疫局、中华人民共和国河南出人境检验检疫局负责起草。本部分主要起草人：刘军义、祝长青、罗兆飞、李卫华、韦梅良、张建军、苗丽。本部分系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 2102. 4—2008/IS0 20838 :2006引言通过目标核酸的扩增和检测可确定样品中是否存在特定的核酸。检测结果的准确性取决于对照控制的有效性和所用方法的检出限。ISO20838:2006，由欧洲标准委员会（CEN)食品分析水平方法技术委员会（CEN/TC275）与食物产品技术委员会（ISO/TC34)微生物小组委员会（SC9)依照ISO和CEN技术合作协议联合制定。本部分修改采用ISO20838:2006，为《食源性病原体PCR检测技术规范》的第4部分，规定了定性PCR技术对食品、饲料、环境样品中病原体的目标核苷酸序列进行扩增、检测和确认的通用要求。 SN/T 2102. 4--2008/IS0 20838 :2006食源性病原体PCR检测技术规范第4部分：定性检测方法扩增和检测要求1范围SN/T 2102的本部分规定了使用PCR技术定性检测食源性病原体的基本准则。包括对目标核酸序列特异性扩增、检测和确认的通用要求。其目标是确保不同的实验室得到的检测结果具有重复性和再现性。本部分适用于食品和饲料中病原体的.PCR扩增和检测环境样品和微生物菌株等其他样品的PCR检测也可参照使用。2规范性引用文件下列文件中的条款通过SN/T2102的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。SN/T2102.1-2008　食源性病原体PCR检测技术规范　第1部分：通用要求和定义ISO16140食品和动物饲料微生物学替代方法确认程序3　术语和定义SN/T2102.1确立的以及下列术语和定义适用于SN/T2102的本部分。3.1实时荧光聚合酶链式反应real-time fluorescence, PCR在常规的聚合酶链式反应的混合物中添加非特异性荧光染料或者特异性荧光探针，通过检测每次循环中的荧光发射信号，间接反睡了PQR扩增的目标基因的量，记录整个 PCR进程，确定Ct值，分析并得出检测结果。3